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| 酶聯科興生物人B-淋巴細胞趨化因子1檢測試劑盒（BLC-1/CXCL13） |
| *,質量保證。 |
| 天津酶聯科興生物長期專業供應ELISA試劑盒,產品種類齊全,包括人、大小鼠、牛羊馬猴等各種種屬的ELISA試劑盒。本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平 |
| 注:本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。 |
| 產品名稱 酶聯科興生物人B-淋巴細胞趨化因子1檢測試劑盒（BLC-1/CXCL13） |
| 產品規格 96T/48T |
| 保存 2-8°C |
| 有效期 6個月 |
| 產品說明書 咨詢銷售人員獲取說明書 |
| 實驗原理: |
| 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔層粘連蛋白(LN)水平。用純化的兔層粘連蛋白(LN)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入兔層粘連蛋白(LN),再與HRP標記的檢測抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔層粘連蛋白(LN)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中兔層粘連蛋白(LN)含量。 |
| 樣品采集: |
1.取動物全血按常規方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。 2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。 3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。 四、兔骨形成蛋白（BMPs）（NF-κBp65)ELISA試劑盒檢驗方法 1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。 2.取所需用量酶標板條，設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。 3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。 4.混勻，置37℃反應30分鐘。 5.扣去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。 6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘。 7.洗滌，同步驟5。 8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。 9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值） |
| 自備物品: |
| 1 、 37 ℃ 恒溫箱 |
| 2 、 標準規格酶標儀 |
| 3 、 精密移液器及一次性吸頭 |
| 4 、 蒸餾水 |
| 5 、 一次性試管 |
| 6 、 吸水紙 |
| 樣本處理及要求: |
| 1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。 |
| 2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 |
| 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 |
| 4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 |
| 5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 |
| 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. |
| 7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 |
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