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安徽皖儀科技股份有限公司

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高效液相色譜法測定食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的含量

閱讀:1898      發布時間:2024-6-24
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甜食少吃!食品中的糖含量不容忽視


摘要

目的:使用皖儀高效液相色譜儀搭配示差折光檢測器檢測食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的含量。

方法:采用示差折光檢測器及Nova Atom NH24.6x250mm5μm色譜柱,流動相為70%乙腈;流速為1.0ml/min;柱溫為40℃;進樣體積為10μl。建立標準曲線,通過外標法計算目標物含量。

 

 

前言

糖類是自然界中廣泛分布的一類重要的有機化合物。日常食用的蔗糖、糧食中的淀粉、植物體中的纖維素、人體血液中的葡萄糖等均屬糖類。糖類在生命

活動過程中起著重要的作用,是一切生命體維持生命活動所需能量的主要來源。植物中最重要的糖是淀粉和纖維素,動物細胞中最重要的多糖是糖原。但是攝入糖分過多會引發糖代謝問題,因此對食品中糖含量進行檢測是十分必要的。

本文參考《GB 5009.8-2023食品安全國家標準 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測定》進行檢測,新標準修改了第一法高效液相色譜法的適用范圍,保留了飲料類,新增了糖果樣品中5種糖的測定,并將《GB 5009.8-2016》中的谷物類、乳制品、果蔬制品、蜂蜜、糖漿等擴大至糧食及糧食制品、乳及乳制品、果蔬及果熟制品范疇。

 

關鍵詞:液相色譜;示差折光檢測器;食品安全國家標準;果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖。

 

1 實驗方法

1.1 儀器配置

1.jpg

高效液相色譜儀LC3200系列

 

1高效液相色譜系統配置清單

2.png


1.2 測試條件

色譜柱:Nova Atom NH25μm4.6x250mm

柱溫:40℃

檢測器:示差折光檢測器

流速:1.0ml/min

流動相:乙腈/=70/30(體積比)

進樣量:10μL

示差折光檢測器條件:溫度45℃。

 

1.3 儀器及試劑、耗材

試劑:超純水乙腈(色譜純)

標準物質:果糖(麥克林)、葡萄糖(damas-beta)、蔗糖(general-reagent)、麥芽糖(麥克林)、乳糖(阿拉丁)

輔助裝置:分析天平;

溶劑抽濾裝置;

超聲波清洗機;

實驗材料:濾膜:水相濾膜0.45μm

 

1.4  溶液配制1.4.1 混合標準儲備液(20.0 mg/ml)

分別稱取經過 90 ℃士2 ℃干燥2h的果糖和 96 ℃士2 ℃干燥2 h的葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和乳糖各1g(精確至 0.001 g),用水溶解后轉移至 50 mL,容量瓶中,加入2.5 mL乙腈,用水定容至刻度。置于0~4 ℃密封,保存期3個月。

 

1.4.2 混合標準工作液:

吸取 0.100ml1.00ml2.00ml3.00mL 5.00ml 混合標準儲備液(20.0mg/ml) 10.0ml, 容量瓶中,用水定容至刻度,配得果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和乳糖的質量濃度為0.200mg/ml,2.00mg/ml,4.00mg/ml,6.00mg/ml, 10.0mg/ml, 的混合標準工作液,可根據實際樣品溶液的濃度適當調整混合標準工作液濃度。臨用現配。

 

1.4.3 樣品配制:(糖漿和蜂蜜類試樣)

稱取混勻后的試樣1g~2 g(精確至 0.001g)100ml, 容量瓶中,加入約50mL,渦旋混勻至充分溶解,轉移至100ml容量瓶中并用水定容至刻度,混勻,靜置。

 

2 結果與討論

2.1 空白

2.2 系統適用性

3.png

2 果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖標準品色譜圖

 

1果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖標準品色譜參數表

4.png

分析:本次分析果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖結果較好,各色譜峰之間分離度>1.5,滿足分離要求。

 

2.2 標準曲線

根據1.4.2配制標準系列溶液,建立標準曲線方程及線性相關系數,檢測結果如下:

5.png

2 果糖標準溶液曲線方程及相關系數


6.png

圖3 葡萄糖標準溶液曲線方程及相關系數


7.png

圖4 蔗糖標準溶液曲線方程及相關系數


8.png

圖5 麥芽糖標準溶液曲線方程及相關系數


9.png

圖6 乳糖標準溶液曲線方程及相關系數

分析:標準曲線線性范圍較好,線性相關系數>0.999

 

2.3 重復性

10.png

圖4 果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖標準品重復性譜圖(n=7)

 

表2 果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖重復性色譜參數表(n=7)

11.png


分析:五種糖類標準品連續進樣7次,重復性結果較好,果糖保留時間重復性RSD值為0.108%;峰面積重復性RSD值為0.345%;葡萄糖保留時間重復性RSD值為0.153%;峰面積重復性RSD值為1.272%;蔗糖保留時間重復性RSD值為0.215%;峰面積重復性RSD值為0.664%;麥芽糖保留時間重復性RSD值為0.257%;峰面積重復性RSD值為0.976%;乳糖保留時間重復性RSD值為0.221%;峰面積重復性RSD值為1.395%。

 

2.4 樣品

12.png

圖5 枇杷秋梨膏樣品色譜圖

 

表3 枇杷秋梨膏樣品色譜參數

13.png


分析:枇杷秋梨膏中不含乳糖,其中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖含量分別為:5.719728mg/mL、6.583038mg/mL、0.120169mg/mL、0.743335mg/mL。

 

3.結論

使用皖儀高效液相色譜儀LC3200系列搭配示差折光檢測器進行檢測,本次分析果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖結果較好,各色譜峰之間分離度>1.5,滿足分離要求。結果顯示:標準曲線線性范圍較好,線性相關系數>0.999;五種糖類標準品連續進樣7次,重復性結果較好,保留時間RSD值<0.3%,峰面積重復性<1.5%。

 


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