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RM8634乙烯四氟乙烯(美國nist標準品)旨在用于驗證大約 1 µm 至 30 µm 尺寸范圍內的液體攜帶顆粒的計數、大小和形態分析。 RM 8634 已被開發用于緊密模擬聚集蛋白質顆粒的光學特性,但也可用于非光學儀器的驗證。
一個 RM 8634 單元由一個小瓶組成,該小瓶含有大約 20 mL 乙烯四氟乙烯 (ETFE) 顆粒在 0.02% 疊氮.化鈉和 0.02% 表面活性劑 [4-(1,1,3,3-四甲基丁基)苯基溶液中的懸浮液-聚乙二醇]。 ETFE 顆粒是通過將本體聚合物對金剛石研磨墊進行濕磨,然后過濾和稀釋來制備的。粒徑分布高度多分散,顆粒形態不規則。
NIST 參考值是未經認證的值,它是基于可用數據對真實值的最佳估計;然而,該值不符合 NIST 的認證標準,并且提供了相關的不確定性,可能僅反映測量精度,可能不包括所有不確定性來源,或者可能反映多種分析方法之間缺乏足夠的統計一致性 [1,2 ]。表 1 和表 2 中提供了粒度分布和形態參考值。這些值在計量上可溯源至使用的測量方法和校準程序
RM8634乙烯四氟乙烯(美國nist標準品) 應冷藏在 2 °C 至 8 °C 以供長期儲存。使用前應讓小瓶溫熱至室溫過夜。如果要進行幾天的測量,RM 8634 可能會在室溫下置于黑暗中長達一個月。請勿對 RM 8634 進行渦旋、電動翻滾或離心。這種處理在重新懸浮顆粒方面是無效的,并且會導致粒度分布的變化。不要將 RM 8634 置于冰凍溫度下。
ETFE 顆粒會沉淀到小瓶底部。在每天分析開始時,必須重新懸浮 ETFE 顆粒。重懸顆粒的有效方法是首先確保小瓶密封牢固,然后將小瓶水平握在手中,前臂垂直,用力來回搖晃 20 秒(來回搖晃約 2 次)每秒)。由于配方中的表面活性劑,此過程會產生大量泡沫。讓小瓶靜置 60 分鐘至 90 分鐘,讓泡沫消散。每 30 分鐘緩慢傾斜和旋轉小瓶 10 次可以增加泡沫消散的速度。不要對溶液進行超聲處理。
在短期儲存和測量之間,顆粒仍將處于懸浮狀態,但會有一些沉淀。首先確保小瓶密封牢固,然后將小瓶水平放在您面前。輕輕地從一側向另一側傾斜小瓶 10 次,同時用每個頂端緩慢旋轉小瓶。對于每個吸頭,小瓶中的氣泡應該從小瓶的一端流到另一端。當小瓶放置超過 10 秒時,應在轉移材料或進行測量之前進行這種短期再懸浮方法。在執行長期儲存再懸浮(如上所述,劇烈搖晃)后,我們已經確認短期儲存方法足以使顆粒在至少 5 小時的過程中保持懸浮狀態。
小瓶和瓶蓋由全氟化聚合物全氟烷氧基 (PFA) 制成。必須小心擰緊蓋子以消除泄漏。同時,過大的扭矩會導致產生額外的大顆粒。 PFA 小瓶螺紋上的摩擦偶爾會產生顆粒。這些顆粒不是 ETFE 顆粒的可觀部分,除非是大尺寸(>50 µm 直徑)。由于這個原因,大粒徑的計數可能具有較差的可重復性。
如果在一個月內從 RM 8634 小瓶中抽取多次,則可以通過首先重新懸浮 ETFE 顆粒,然后將顆粒溶液轉移到預先清潔的聚對苯二甲酸乙二醇酯 (PETG) 小瓶中來最大限度地減少螺紋碎片。 PETG 樣品瓶對超聲處理具有很強的抵抗力,并且螺紋碎片最少。不建議在 PETG 中長期儲存,因為一個月后可能會出現外來的小顆粒(通常小于 2 µm)。RM 8634 顆粒溶液可以通過移液器轉移,前提是在轉移前混合懸浮液。應確認移液器吸頭有助于低顆粒負載(例如,帶有內置屏障的移液器吸頭)或在使用前*沖洗。RM 8634 顆粒溶液可以用水/甘油混合物稀釋,以降低 ETFE 顆粒的光學對比度,如參考文獻 4 中所述。RM 8634 溶液的稀釋比例不應超過 RM 8634 的 1 至 3 倍份稀釋劑(按體積計),以確保最終溶液中有足夠的表面活性劑以防止 ETFE 聚集。
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