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IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)標準品樣品的描述每個小瓶包含一個糞腸球菌的物質球體(CIP 106877)
IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)分別用于根據ISO 7218[1]和ISO 7899-2[2],在馬血瓊脂或斯蘭內茨和巴特利瓊脂上菌落計數測定糞腸球菌。該制劑中的細菌細胞在室溫下不能存活。因此,在分析過程中,從冰箱中逐個拿出小瓶。在所有步驟中都要使用無菌耗材,并在無菌條件下工作。
馬血瓊脂(標準電鍍)
1。每個材料球使用10個適當條件的介質板。
2.通過無菌地去除塞子,打開含有材料球體的小瓶。
3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質量濃度為0.9 g/L)。等待30秒,通過上下移液來均勻化。
4.通過將9份100µL和10個瓊脂平板上,確保盡可能從小瓶中除去液體。
5.使用一個一次性無菌撒布機(無玻璃撒布機)將溶解的材料均勻地攤鋪在板表面,避免板的邊緣。
6.在最后一個板的瓊脂表面上輕輕上下移動其上的末端5次,以幫助去除其上的任何剩余液體。
7.在室溫下干燥盤子30分鐘,然后再倒置。
8.在37°C±1°C下孵育14小時至24小時。
Slanetz和Bartley瓊脂(膜過濾)
1。每個材料球使用20個適當條件的介質板。
2.通過無菌地去除塞子,打開含有材料球體的小瓶。
3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質量濃度為0.9 g/L)。等待30秒,通過上下移液來均勻化。
4.確保將19份50µL和一部分含有剩余溶液的液體分配到20個獵.鷹管上,每個管中含有10 mL的氯化鈉水溶液(質量濃度為0.9g/L)。
5.使用帶有真空歧管的膜過濾裝置在每個Falcon管中過濾溶液,并使用包含47 mm膜(孔徑0.45µm)的過濾漏斗:
5a。將溶液倒在過濾器上,吸出
5b。激活吸力以除去溶液
5c。用10 mL的氯化鈉(質量濃度為0.9 g/L)水溶液沖洗Falcon管,關閉吸力后倒入過濾器。
5d.激活吸力,取出溶液
5e。重復沖洗(共清洗2次)
6.用無菌鑷子把過濾器放在瓊脂平板上。
7.在室溫下放置盤子30分鐘,然后再翻轉。
8.在36°C±2°C下孵育40小時至44小時。
存儲
IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)標準品瓶應立即使用,也可以存儲在-20°C或-70°C。如果儲存在-20°C下,應避免稍后的溫度轉移回-70°C,因為我們對隨后的儲存溫度變化對細菌細胞活力和恢復的影響知之甚少。然而,歐盟委員會不能對在客戶的場所儲存材料期間發生的變化負責,特別是對打開的樣品。
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