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IRMM-354 白色念珠菌 (NCPF 3179)標準品樣品的描述每個小瓶包含一個白色念珠菌的材料球(NCPF 3179)。
本CRM分別用于根據ISO 7218[1]和ISO 13681[2],在營養瓊脂或OGYE瓊脂上菌落計數測定白色念珠菌。這種制劑中的酵母細胞在室溫下不能存活。因此,在分析過程中,從冰箱中逐個拿出小瓶。在所有步驟中都要使用無菌耗材,并在無菌條件下工作。
1.每個材料球使用10個適當條件的介質板。對于OGYE瓊脂,采用了倒鍍技術(見下文)。使用空培養皿,根據制造商的說明準備培養基。
2.通過無菌地去除塞子,打開含有材料球體的小瓶。
3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質量濃度為0.9 g/L)。孵育30秒,通過上下移液均質。
NA(標準電鍍)
4。通過在10個瓊脂平板上分配10份100µL,確保盡可能地從小瓶中除去液體。
5.使用一個一次性無菌撒布機(無玻璃撒布機)將溶解的材料均勻地攤鋪在板表面,避免板的邊緣。
6.在最后一個板的瓊脂表面上輕輕上下移動傳播者的末端5次,以幫助清除傳播者上的任何多余的液體。
7.在室溫下干燥盤子30分鐘,然后再倒置。
8.在37°C±1°C下孵育36小時至48小時。
OGYE瓊脂(倒入鍍層)
4。通過在10個空培養皿上分發10份100µL,確保盡可能地從小瓶中去除液體。
5.加入或倒入約15 mL的熔融(OGYE)瓊脂,冷卻至45°C,并立即旋轉以攪拌均勻。每次在盤子中加入瓊脂后旋轉。不要等到瓊脂被添加到所有的盤子里再去了。
6.先在室溫下凝固和干燥,45分鐘,然后翻轉。
7.在25°C±1°C下孵育36小時至48小時。
存儲
IRMM-354 白色念珠菌 (NCPF 3179)標準品瓶應立即使用,也可以存儲在-20°C或-70°C。在-20°C或-70°C下保存長達18個月時,未檢測到該材料的不穩定性。然而,如果儲存在-20°C下,應避免稍后的溫度轉移回-70°C,因為對后續儲存溫度變化對酵母細胞活力和恢復的影響知之甚少。然而,歐盟委員會不能對在客戶的場所儲存材料期間發生的變化負責,特別是對打開的樣品。
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