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NIBSC 00/410 脊髓灰質炎病毒1型MAPREC分析
1. 預期用途
流感抗血清試劑 08/210 在綿羊中制備,用于 A/Cambodia/R0405050/2007 抗原的單次徑向擴散測定。每次檢測都應包含適當的 NIBSC 試劑
2. 注意
NIBSC 08/210 流感抗A(標準品) 不適用于人類食物鏈中的人類或動物。
該材料不是人或牛來源。與所有生物來源的材料一樣,這種制劑應被視為對健康有潛在危害。應根據您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應包括戴防護手套和避免產生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應小心謹慎,以免割傷。
3. 單元
沒有為該材料分配單元。
4. 內容
生物材料原產國:英國。
抗血清試劑在綿羊 SH489 和 SH494 中制備為 NIBRG-86 的純化 HA(通過反向遺傳學與來自A/Cambodia/R0405050/2007 的 HA(經修飾以去除多堿基切割位點)和 NA 制備的重配體)。通過用菠蘿蛋白酶處理純化的病毒中提取 HA 抗原并通過在蔗糖梯度上沉降來純化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。
綿羊 SH489 的免疫計劃如下:肌肉注射一劑約 50 微克 HA 和弗氏*佐劑 (FCA),兩周后給予 10 微克 HA 和弗氏不*佐劑 (FIA) ),每周間隔給予四次 10 微克劑量的 HA 和 FIA。
初次免疫后七周,收集血清并加入NaN3(0.05% w/v)。綿羊 SH494 的免疫方案如下:肌肉內給予一劑約 50 微克 HA 和 FCA,兩周后給予 10 微克 HA 和 FIA,另外三劑 10 微克 HA 和 FIA每周間隔一次,然后是另外七次 20 微克劑量的 HA 和 FIA,同樣每周一次。初次免疫后 13 周,收集血清并添加NaN3(0.05% w/v)。
來自 SH489 的血清通過維持 pH5.49 40 分鐘進行處理,然后恢復原始 pH。來自 SH494 的血清通過維持 pH5.49 40 分鐘進行處理,然后恢復原始 pH。然后將來自 SH489 和 SH494 的血清匯集并用含有NaN3(0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液按 1:2 稀釋并裝入 2ml 體積的小瓶中。
5. 存儲
+2-8oC
請注意:由于凍干材料固有的穩定性,NIBSC 可能會在環境溫度下運輸這些材料。
6. 開瓶指南
NIBSC 08/210 流感抗A(標準品) 樣品瓶有一個“上翻式"圓形瓶蓋。無論是在瓶蓋上還是在小瓶的套環上,都標有撬開瓶蓋的位置。這暴露了塞子的一個區域,通過該區域可以使用皮下注射針頭和注射器進行制劑的重構和取出。如果首先使用移液器,則使用鑷子等*取下金屬項圈,戴上合適的手套注意避免割傷。取下塞子以便進入。應注意防止內容物丟失。
7. 材料的使用
對于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的測定,應將大約 20μl 未稀釋的試劑添加到 1ml 瓊脂糖中。可能需要根據當地實驗室條件改變抗血清濃度。
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