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應用領域 | 醫療衛生,環保,生物產業 |
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FAS-Digi 緊湊型凝膠成像系統
FAS-Digi 緊湊型凝膠成像系統 緊湊型凝膠成像系統
想象一下從 DNA 和 RNA 凝膠中獲得精細的細節
FAS-Digi 緊湊型凝膠成像系統專為需要強大的凝膠記錄系統但工作臺空
間有限的實驗室而設計。該成像平臺圍繞FastGene Blue/Green LED Gel
TransIlluminator XL 構建,它利用超亮藍/綠 LED *技術. 海藍寶石色照明是激發常見熒光 DNA 染料(如 EtBr 和 Sybr Green)的*。與紫外線透射儀相比,您始終可以期待至少相同的結果,但不會有損壞 DNA 或傷害您的皮膚和眼睛的風險。這是因為來自這些 LED 的能量較低的光子與紫外線不同,不會使 DNA 交聯,從而使藍/綠 LED 能夠提高您實驗室的亞克隆效率。與純藍色 LED 成像器相比,該系統旨在產生更強的信號和更低的背景。根據設計,它從相對側(雙 LED 矩陣)照明,而不是像大多數其他凝膠照明器那樣從下方直接照射光。FAS-Digi Compact 是為與溴化乙錠 (EtBr) 等紅色染料或下一代非致癌染料一起使用而開發的,Midori Green系列安全染料。LED 比傳統的紫外線燈泡更安全、更高效,使 FAS-Digi 緊湊型系統非常小巧且非常耐用。
安全照明與紫外線照明
紫外線:良好的信號,不健康的副作用
紫外光透射儀使用單一波長來顯示 DNA。紅色和綠色 DNA 染料,例如溴化乙錠或 Midori Green 染料在紫外光譜中具有良好的吸收性。這會產生具有足夠強度的 DNA 條帶,但是,紫外光對用戶和樣本 DNA 都是危險的。僅 30 秒的紫外線照射就會顯著降低克隆效率,并對下游應用產生影響。出于這個原因,用紫外光觀察 DNA 不是方法。
藍/綠:對所有 DNA 染料進行安全和強大的檢測
與紫外光相比,藍/綠 LED 技術使用 470 nm 和 520 nm 之間的寬光譜。這種光對 DNA 或用戶無害。即使是溴化乙錠或其他在該光譜區域具有低吸收的紅色 DNA 染料,其 DNA 條帶強度也可與紫外線照射相媲美。其原因是 DNA 在藍/綠光譜中的累積能量吸收(曲線下面積)。綠色 DNA 染料在藍/綠光譜中顯示出非常高的吸收強度,導致 DNA 條帶的強度更高。
升級您的相機
使用佳能 EOS 250D 拍攝高質量的瓊脂糖凝膠圖像。這臺相機有一個巨大的 APS-C CMOS 傳感器。該傳感器從 ISO 100 一直到 ISO 1600 都不會產生任何可見的噪音。此外,它的 24 兆像素甚至可以檢測到微弱的信號。傳感器的曝光時間可以設置為 1/4000 秒到 30 秒。很短的曝光時間保證了即使是亮的 DNA 條帶也能在動態范圍內可見。將傳感器暴露 30 秒將
能夠檢測到您的眼睛看不到的條帶。3 倍光學變焦(焦距為 18 毫米至 55 毫米)提供
了對感興趣區域的放大。
易于訪問
FAS Digi 緊湊型系統具有內置的琥珀色過濾器觀察窗,可讓您觀察發光的凝膠,并
解放雙手,、輕松地切割凝膠帶。如果與我們的Midori Green Stain一起使用,
您也無需擔心誘變染料!快速、且*安全,這是處理 DNA 的佳方式。在常
規處理 DNA 以進行亞克隆、基因分析或其他應用時,根本沒有理由讓您或您的實驗
室工作人員處于危險之中。
對您更安全,對您的亞克隆更好
通過使用安全的 MIDORI Green 染料和安全的藍/綠 LED 照明,您可以將亞克
隆轉化效率提高三倍. 在下面的示例中,質粒載體用合適的限制性內切酶雙重消化,
產生兩個粘性末端 DNA 片段:lacZ 基因 (3,536 bp) 和載體骨架 (4,318 bp)。在
1% 瓊脂糖凝膠上對等量的消化 DNA 進行電泳。根據相應的手冊,用溴化乙錠或
MIDORI Green Direct 凝膠染料對凝膠進行染色,然后分別使用 UV 透射儀或
FastGene 藍/綠 LED 照明器進行觀察。從凝膠上切下兩個 DNA 片段并使用基于
硅膠膜的純化試劑盒進行純化。使用轉化到 DH5a 細胞中的 T4 DNA 連接酶
將 lacZ 基因和載體骨架重新連接并鋪板到選擇板上。計數藍色和白色菌落的總數
以評估克隆效率。每個實驗一式三份進行,并確定平均克隆效率。MIDORI Green
Direct 導致陽性轉化體的顯著增加。
溴化乙錠通常與強紫外光源結合使用,以在連接反應之前切除 DNA 條帶以進行純
化。大家都知道的,短波長光會導致胸腺嘧啶二聚體并破壞 DNA。這種損害的程度并不
總是受到重視。高能光在幾秒鐘內就對 DNA 片段造成嚴重破壞。如下所示,在標準
瓊脂糖凝膠中僅暴露 15 秒 DNA 后,克隆效率開始下降。曝光 30 秒后,你的克隆實驗幾乎死了!相比之下,使用藍色 LED 或 Nippon Genetics 的超高性能藍色/綠色 LED 的方案的克隆效率*不受這種有害影響的影響。如果您的實驗室無法擺脫溴化乙錠的習慣,請使用藍/綠 LED 照明器(或成像系統)仍應對 DNA 完整性和克隆效率產生直接的積極影響。
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