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應用領域 | 醫療衛生,環保,生物產業 |
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Midori Green Direct — 安全的 DNA 染色劑
Midori Green Direct — 安全的 DNA 染色劑 Midori Green Direct
將其放入您的樣品而不是您的凝膠
MIDORI Green Direct 是一種特殊構造的熒光分子,您可以將其添加到您的樣品中,而不是添加到凝膠或緩沖液中。
它將結合并標記核酸片段(DNA 或 RNA),因為它們在標準電泳運行期間分離和分解。這些標記的分子會在近乎黑色的
背景下發出明亮的光芒。相比之下,添加到熔融瓊脂糖中的核酸染色劑(在凝膠澆鑄之前)通常具有“雙色調外觀",因
為游離染料沿 DNA 片段的相反方向移動并導致凝膠底部變大。比頂部暗。當檢測靈敏度或易用性是重要考慮因素時,許
多實驗室更喜歡 MIDORI Green Direct。
MIDORI Green Direct 以 10X 樣品上樣染料的形式提供,旨在“直接"添加到您的樣品中。您無需將其或任何其他染料
添加到凝膠基質或運行緩沖液中。1 mL 試管足以容納 1,000 至 2,000 個樣品(通道)。
您不僅可以使用現有的 UV 透照器和濾光片套件 — MIDORI Green Direct 與藍色 LED 或特別是基于藍色/綠色 LED的照
明器和凝膠文檔系統配合使用時效果非常好。這些環保的光臺是任何 MIDORI Green 染色劑的很好補充,因為您可以在
切除條帶或成像遷移時無防護罩和無護目鏡工作。由于藍光或綠光不會交聯 DNA,
因此您無需擔心在克隆和拍攝過程中會損壞 DNA。
*測試您的安全
無毒。非誘變。MIDORI Green Direct Nucleic Acid Stain 是傳統溴化乙錠 (EtBr) 染料的安全替代品,用于檢測瓊脂
糖凝膠中的 dsDNA、ssDNA 和 RNA。這種專有染色劑已通過四種不同的測試證明是安全的. MIDORI Green Direct
在 Ames 測試中導致較少的突變,這是*的致癌物和致畸劑測試的行業標準。該測試中的高致突變性通常與致癌物和致
畸物有關。安全的另一面是毒性,所有 Midori Green 污漬也是無毒的!MIDORI Green Direct *的分子結構使其無法
通過活細胞的質膜。這允許增加一層保護,因此 Direct 甚至無法對駐留在生物體細胞內的 DNA 或 RNA 分子進行制造
。水生毒性測試和腐蝕性、反應性和可燃性測試都表明 MIDORI Green Direct 不是危險廢物,可以根據標準實驗室程序
進行處理,使技術人員和學生在實驗室中使用既方便又安全。EtBr 和其他一些“安全 DNA 染料"不被認為是無毒的,必
須以更嚴格的方式處理。對于那些喜歡更加安全的人來說,MIDORI Green Direct 就像Advance,也測試了乳膠/丁腈手套
滲透陰性。
三個組成一個幸福
的家庭 核心 MIDORI Green 分子已被配制成三種不同的綠色熒光染料,針對您的實驗室需求進行了優化。先是 MIDO
RI Green Advance,它提供出色的信噪比和對短核酸片段的可靠靈敏度。MIDORI Green Advance 在運行樣品之前添加
到瓊脂糖凝膠中(很像 EtBr),當使用藍色 LED 或 Nippon Genetics 的藍/綠 LED 技術進行可視化時,提供與
EtBr 相當的檢測靈敏度. 第二種是 MIDORI Green Direct,旨在與您的樣品混合并加載到無染色凝膠上。MIDORI Green
Direct 包含上樣染料,可將核酸片段檢測到與 MIDORI Green Advance 相似(如果不是稍好)的水平。該系列的*成
員是 MIDORI Green Xtra。與 Advance 一樣,Xtra 被添加到熔融的瓊脂糖和緩沖液中。它的化學結構針對藍/綠和藍色
LED 燈進行了優化,從而在瓊脂糖凝膠中產生優質的 DNA 和 RNA 熒光信號。MIDORI Green Advance 和
MIDORI Green Direct 染料與紫外線兼容,但在使用紫外線而不是 LED 的非破壞性可見激發光時效率略低。對于實
驗室而言,重要的是,MIDORI Green Xtra 不會對瓊脂糖凝膠進行染色,從而獲得出色的信噪比。
對您更安全,對您的亞克隆更好
通過使用安全的 MIDORI Green 染料和安全的藍/綠 LED 照明,您可以將亞克隆轉化效率提高三倍. 在下面的示例中,
質粒載體用合適的限制性內切酶雙重消化,產生兩個粘性末端 DNA 片段:lacZ 基因 (3,536 bp) 和載體骨架 (4,318 bp)。
在 1% 瓊脂糖凝膠上對等量的消化 DNA 進行電泳。根據相應的手冊,用溴化乙錠或 MIDORI Green Direct 凝膠染料對
凝膠進行染色,然后分別使用 UV 透射儀或 FastGene 藍/綠 LED 照明器進行觀察。從凝膠上切下兩個 DNA 片段并使用
基于硅膠膜的純化試劑盒進行純化。使用轉化到 DH5a 細胞中的 T4 DNA 連接酶將 lacZ 基因和載體骨架重新連接并鋪
板到選擇板上。計數藍色和白色菌落的總數以評估克隆效率。每個實驗一式三份進行,并確定平均克隆效率。MIDORI
Green Direct 導致陽性轉化體的顯著增加。
溴化乙錠通常與強紫外光源結合使用,以在連接反應之前切除 DNA 條帶以進行純化。大家都知道的,短波長光會導致
胸腺嘧啶二聚體并破壞 DNA。這種損害的程度并不總是受到重視。高能光在幾秒鐘內就對 DNA 片段造成嚴重破壞。
如下所示,在標準瓊脂糖凝膠中僅暴露 15 秒 DNA 后,克隆效率開始下降。曝光 30 秒后,你的克隆實驗幾乎死了!
相比之下,使用藍色 LED 或 Nippon Genetics 的超高性能藍色/綠色 LED 的方案的克隆效率*不受這種有害影響的
影響。如果您的實驗室無法擺脫溴化乙錠的習慣,請使用藍/綠 LED 照明器(或成像系統)仍應對 DNA 完整性和克隆
效率產生直接的積極影響。
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