Cellix微流控泵 Cellix提供用途各異的微流控泵。普通注射泵用于微流控生物芯片時常出現流動不平穩的現象,Cellix采用有的技術,有效消除了脈動現象,使得流動非常平穩,并實現了主動流量控制以j確投送樣品。Cellix泵即可進行單流道實驗,又可用于多流道實驗,而且在進行多流道實驗時,各流道之間的流動可保持相互立。Cellix泵簡單、易用,可通過iPad、iPod及筆記本電腦進行控制,是進行微流控、流體剪切、樣品混勻和細胞培養研究的理想選擇。 1、ExiGoTM泵 系統簡介 ExiGoTM泵是一種可由iPad mini和LabVIEW接口進行控制的注射泵。ExiGoTM多支管是一種微流體流道選擇器。二者通常配套使用,通過控制程序可以在三個流道之間進行j確的切換,減少了死體積,性能越。
系統特點 集成了流動傳感器,通過主動反饋來j確控制流量 流量范圍:10 nL/min - 20 mL/min 標準注射器:100μL - 5mL 具有清洗模式和可編程灌注模式(恒定型、截流型、步進型、正弦型),方向可逆 不同流動模式間切換速度快(ms) 能長時間穩定運行 WiFi通訊,通過iPad mini多能同時控制4個泵立運行 也可通過USB線連接筆記本電腦上,用LabView軟件進行控制 可通過標準的管路連接任意微流控生物芯片
應用范圍 微納流體、微滴生成和操縱、平穩流動、(多)層流研究、多流道混合、對細胞進行流體剪切刺激、細胞及顆粒操縱 2、UniGo注射泵 系統簡介 UniGo™微流控注射泵是一種能j確控制流量的單流道壓力泵,在微流控研究中有著廣泛的應用。本泵主要依靠注入空氣來產生壓力,推動注射器單向前進。UniGo™泵配有即插即用的流體傳感器來實現主動反饋,增加了流體控制能力。自帶的控制軟件可同時操縱四臺UniGo™泵,并且可對各個泵進行立編程。UniGo™泵與ExiGo™泵連用可使微流控實驗設計更加靈活。
系統亮點 兩種運行模式:手動流量控制和預編程流量控制(恒定型、截流型、步進型、正弦型) iPad mini軟件通過Wi-Fi進行控制,也可通過USB線連接筆記本電腦上,用LabView軟件進行控制 觸控電源 LED顯示電源和運行狀態信息 可四泵連用 流量范圍:1 μL/min – 1 mL/min
3、4U四流道泵 系統簡介 4U™微流控注射泵是一種能j確控制流量的四流道壓力泵,在微流控研究中有著廣泛的應用。本泵主要依靠注入空氣來產生壓力,推動注射器單向前進。自帶的控制軟件可同時操縱四個流道,并且可對各流道進行立編程。
系統亮點 兩種運行模式:手動流量控制和預編程流量控制(恒定型、截流型、步進型、正弦型) iPad mini軟件通過Wi-Fi進行控制,也可通過USB線連接筆記本電腦上,用LabView軟件進行控制 觸控電源 流量范圍:1 μL/min – 1 mL/min
4、KIMA微流控泵 系統簡介 KimaTM泵是可循環的微流控泵,由iPod Touch進行控制。
系統亮點 可置于孵箱內運行 長時間循環灌注 具有清洗和灌注兩種運行模式 流量范圍:15 - 35mL/hr ± 4% 死體積< 300μL iPod Touch通過WiFi通訊可同時控制四臺泵 配有各種尺寸的軟管,可連接多種微流控生物芯片
應用范圍 對細胞施加流體剪切刺激、生物膜研究、貼壁細胞(HUVECs,stem cells, HepG2 cells等)生物芯片培養 5、MIRUS EVO NANOPUMP微流控泵 系統簡介 MirusTM Evo Nanopump是一種通過VenaFluxAssay軟件進行控制的微流控注射泵
系統亮點 通過MultiFlow8將流體平均分配至8個流道,并行檢測,通量更高 每個流道均有一個閥門,可自由開關 采用技術,減輕了注射泵的震動,流量控制更加準確 流量范圍:100nL/min - 10mL/min ± 1% 標準注射器型號:50μL - 5mL 死體積約600μL 流動方向可逆 通過VenaFluxAssay電腦軟件進行控制 在沒有MultiFlow8的情況下也可立使用
應用范圍 微流控研究、單細胞分析、生物芯片中對細胞施加流體剪切。適用于細胞樣品和血樣品。 6、微流控泵傳感器 系統簡介 Cellix微流控泵傳感器可對流量進行主動反饋,實現了j確穩定的流量控制,與ExiGo™, UniGo™ and 4U™兼容。
系統亮點 主動反饋和PID(比例、積分、微分)控制 流量j確 測量范圍:±1,500 nL/min (1.5 μL/min); ±7,000 nL/min (7.0 μL/min); ±80,000 nL/min (80.0 μL/min); ±1 mL/min
應用范圍 需要嚴格控制流量的微流控實驗
Cellix生物芯片 1、DROPCHIP 系統簡介 DropChip芯片含有三個微滴產生器和一個分流器(分流水、油等連續相),與ExiGo微流控泵配套使用,可用于產生微滴。
系統亮點 可重復使用 通過控制流道尺寸、流量、油的種類、表面活性劑類型和濃度可產生不同的微滴
應用范圍 高通量產生微滴和單分散性乳液 2、VENA8 FLUORO+生物芯片 系統簡介 Vena8 Fluoro+TM生物芯片適用于研究細胞在包被有蛋白的基底或單層培養的細胞上的滾動和粘附,在血栓形成和血檢測中有著重要的應用,可用熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡進行觀察。
系統亮點 流道尺寸(H x W x L)為100 μm x 400 μm x 2.8 cm 可用于活細胞和固定細胞的免疫熒光染色 樣品用量少,適用于血、原代細胞、稀有細胞(如樣本來源稀缺或難以培養的細胞) 適用于高流速、高切應力下的研究,如血小板粘附、血栓聚集和形成。普通流動腔因為需要大量的血而難以進行研究 操作簡便,無需裝配,一次性使用
應用范圍 小樣本檢測(血、細胞懸液、蛋白質)等;熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡檢測。 3、VENA8 ENDOTHELIAL+生物芯片 系統簡介 Vena8 Endothelial+適用于流體剪切下細胞在包被有蛋白的基底或單層培養的細胞上的滾動和粘附的研究,可用明場、相差顯微鏡和熒光顯微鏡進行觀察。收集的樣本可用于PCR檢測。
系統亮點 流道尺寸(H x W x L)為120μmx 800 μmx 2.8 cm 流體剪切下細胞滾動和粘附測試 可收集流道中培養的細胞(多達320,000個)用于后續檢測,如PCR等。 樣品用量少,適用于血、原代細胞、稀有細胞(如樣本來源稀缺或難以培養的細胞) 操作簡便,無需裝配,死體積小(約0.1 μL)
系統應用 小樣本檢測(血、細胞懸液、蛋白質)等;明場、相差顯微鏡、熒光顯微鏡檢測。 4、VENAT4-趨化、跨膜遷移、浸潤檢測芯片 系統簡介 VenaT4™芯片適用于趨化、跨膜遷移、浸潤檢測芯片,可用明場、相差顯微鏡和熒光顯微鏡進行觀察。
系統亮點 流道尺寸(H x W x L)為100 μm x 800 μm x 2.8 cm 模擬生理環境,細胞在流體剪切環境下粘附至多孔膜(2-10 μm孔徑)上,然后跨膜遷移至含有趨化因子的microwell中 兼容多種胞外基質,如膠原、水凝膠、matrigel等 細胞也可培養的microwell中 距離小,比傳統的趨化性檢測更快 樣品用量少,適用于血、原代細胞、稀有細胞(如樣本來源稀缺或難以培養的細胞) 操作簡便,無需裝配,死體積小(約0.1 μL)
系統應用 趨化、跨膜遷移、浸潤實驗及明場、相差顯微鏡和熒光顯微鏡觀察 5、VENA8芯片 系統簡介 Vena8芯片有8條平行流道,可包被蛋白和接種細胞,然后研究流體剪切下藥物相互作用、進行顯微觀察或分子生物學檢測。基底為玻璃蓋玻片,可單提供也可固定于芯片上。蓋玻片可進行無菌處理并包被高密度PEG,也可不做任何處理。流道表面也易于包被蛋白。
系統亮點 流道尺寸(H x W x L)為160 μm x 1600 μm x 2.8 cm 既適用于低剪切力研究,又適用于高剪切力研究 樣品用量少,適用于血、原代細胞、稀有細胞(如樣本來源稀缺或難以培養的細胞) 適用于高流速、高切應力下的研究,如血小板粘附、血栓聚集和形成。普通流動腔因為需要大量的血而難以進行研究 適用于生物膜研究,使用者可在芯片底部固定各種類型的生物膜 操作簡便,無需裝配,死體積小
應用范圍 小樣本檢測(血、細胞懸液、蛋白質)等;熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡檢測。 6、VENADELTAY1和VENADELTAY2芯片 系統簡介 VenaDeltaY1™ and VenaDeltaY2™芯片含有分支微流道,適用于雙流體/雙注射樣本,是研究化學梯度、雙流動、多層流和擴散的理想選擇。
系統亮點 流道尺寸(H x W x L)為(100-120)μm x(400-800)μm x 2.8 cm 可用于明場、相差顯微鏡和熒光顯微鏡觀察 樣品用量少,適用于血、原代細胞、稀有細胞(如樣本來源稀缺或難以培養的細胞) 操作簡便,無需裝配,死體積小 可滅菌和重復使用
應用范圍 化學梯度、雙流動、多層流和擴散研究
細胞分析軟件 1、DUCOCELL細胞分析軟件 軟件簡介 DucoCell是一種圖像分析軟件,可以用于細胞計數和形態測量。
軟件亮點 自動檢測和計數 分析參數多樣,可分析細胞面積、直徑、規化形狀因子、橢圓度、偏心距、方向、周長、不對稱性、形心、橢圓軸等 可根據細胞形態參數篩選子群體 數據可導入Excel表,并自動產生圖表
2、IMAGE PRO PREMIER細胞分析軟件 系統簡介 Image Pro Premier細胞圖像分析軟件可分析細胞形態、細胞運動錄像和微速攝影錄像。
系統亮點 捕獲:快速捕獲單幀圖像 處理/分析:自動對齊并且擴展景深;比較圖像;提取和合并顏色通道;三維重建圖像;編輯錄像;圖像批處理 測量/定量:強度測量、邊緣檢測和分析、目標跟蹤 計數/分類:分析目標的空間分布、對目標進行分類、測量目標內部的小目標 結果報告:注釋和拷貝圖像、出具pdf/word/ppt/excel格式的結果報告、記錄工作步驟等
自動化平臺 1、INISH便攜式血液分析 系統簡介 Inish便攜式血液分析可用于細胞和粒子分析,能在60秒內得到結果,部操作只有三步,易于操作且可以避免污染。
系統亮點 便攜式(16.1 x 9.4 x 8.3;41 x 24 x 21 cm兩種規格)、低成本 靈敏度與流式細胞儀相同,結果可靠,用BD’s Accuri和Sysmex XP-300進行過校準
系統應用 分析血液中紅細胞和白細胞亞群 病人身邊檢測、急診、野外(如戰場)檢測、診室檢測
2、VENAFLUX平臺 系統簡介 自動化微流體平臺,可進行流體剪切下細胞滾動、結合/粘附和遷移的研究。
系統亮點 系統穩定,易用 可使用血進行血小板粘附、聚集和血栓形成研究;長時程觀察細胞在生物膜上的生長 同時進行多個體外實驗,以與利用動物模型進行的體內實驗相對比
系統應用 細胞-配體和細胞-細胞相互作用研究 細胞粘附和遷移的形態學分析 跟蹤細胞 可獲得IC50(半抑制濃度)曲線 預臨床藥物開發和化
應用實例 微流體設備 活細胞觀察生物芯片
微流控生物芯片可以模擬體內毛細血管的結構,是進行活細胞成像觀察的得力工具。和傳統的玻璃毛細管相比,生物芯片具有一些顯著點,無光學畸變現象,分辨率高,在明場、相差顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡下均可觀察(圖1A)。流道內可以包被粘附分子和培養不同的細胞,用于研究細胞滾動、粘附、遷移、浸潤、跨膜(圖1B)等過程,用法非常靈活。 圖1 Cellix微流體實驗平臺及其應用 細胞和顆粒操縱
在物理、化學和生物學研究中經常需要操縱細胞和顆粒。膜片鉗、生物芯片、光鑷、磁鑷、聲鑷、水動力學和介電流方法都是常見的操縱方法。Cellix主要用于生物芯片、水動力學和磁鑷等方法中。 微滴產生和操縱
j確地控制生物芯片中的液體流動可以產生所需的微滴。在封裝、化學合成和生化檢測中經常會用到微滴。應用生物芯片產生微滴時要求芯片具有T形噴嘴和聚焦成像設備。Cellix提供各種型號的此種芯片,與ExiGO泵連用可以產生各種微滴(圖1)。 圖1 DropChip生物芯片制作微滴。 快速切換與物質輸送
微流控實驗對流體操縱和控制的j確要求j高,在不同的流體樣本之間快速切換是成功進行許多實驗(如微滴產生)的關鍵。Cellix的ExiGo注射泵精度j高,方便攜帶且使用簡單,可同時運行四臺立的注射泵,在低流量情況下也能保證精度。ExiGo泵可實現步進、截流、線性和正弦波形,通過配套的流量傳感器進行反饋控制,保證了運行精度。 下圖為三臺ExiGo泵(圖1A)之間的快速切換,切換頻率為2 s,圖中不同顏色是溶解有不同顆粒的液體(圖1B,C)。 圖1 利用ExiGo泵進行多層流之間的切換。通過三臺ExiGo泵(A)快速切換,三層流動(B)轉換為了兩層流動(C)。 水力聚集
水力聚集是在微流體混合、分離、阻抗傳感器和流式細胞儀中廣泛采用的技術。水力聚集有很多種實現方法,生物芯片是其中的一種。通常情況下,生物芯片具有三個流體入口,樣品流位于中央,可以被兩側更快的流動所形成的鞘液聚集。ExiGo泵可實現此功能(圖1)。 圖1 水力聚集 層流研究
層流是流體規律的運動形態,層流中各點運動方向均與流動方向相同。在這種情況下,由擴散導致的側向混合非常慢。毛細胞血管中的血液流動和微流控芯片中的流動均可視為層流。層流研究可以更好地理解人類微循環規律,并有助于開發出微尺度上操縱流體的新方法。作為一個例子,圖1展示了如何利用截流來實現粒子向特定流道的運輸。 圖1 ExiGo泵實現粒子定向運輸。兩臺ExiGo泵連用(A),其中一個為截流,另外一個則可將粒子運送至特定的通道(B)。
細胞生物學 血小板粘附和聚集
使用Cellix微流體泵和生物芯片可以很容易地研究血小板、聚集和血栓形成。生物芯片具有多種結構,可以模擬毛細血管,重現了生理微環境。使用微流體設備的另外一個點是減少了樣品用量。通常,經過抗凝處理后的血液在2-3個小時之后也會凝固,研究人員必須在這段時間內完成研究,這就要求研究要很快,且通量要高。在8流道的芯片中包被血管性血友病因子、膠原、纖連蛋白或其它蛋白后,利用Mirus Exo泵可以同時進行8個實驗。Cellix Vena8 Fluroro+芯片就是這樣一種芯片,可以用激光共聚焦顯微鏡進行成像,在流體剪切下血小板滾動、粘附、聚集、與內皮細胞相互作用和抗凝血研究中得到了廣泛的應用(圖1、2)。 圖1 血管性血友病因子(VWF)與膠原包被底板上血小板的粘附。 圖2 前列腺素E2受體EP4的表達抑制血小板聚集和血栓形成。在膠原包被的流道中,經過不同處理的血(A)血小板聚集發生了變化(B)。 細胞滾動、粘附和遷移
細胞沿著血管壁的滾動、粘附和遷移是細胞進行信號轉導的重要步驟,與炎癥反應和癌癥、心血管疾病、感染和呼吸系統疾病(如哮喘)的治療密切相關。使用Cellix微流體泵和芯片可以很容易地研究這些過程。Cellix八流道Mirus Evo泵可以同時進行進行八個實驗,ExoGo泵則適合進行單個實驗。Cellix芯片的流道內可以包被選擇素、VCAM/ICAM/MadCAM等粘附分子、MCP-1、趨化因子及其它蛋白。使用Kima泵還可以培養內皮細胞(如HUVECs,HMVECs,HLMECs),進而研究細胞間相互作用(圖1)。 檢測類型: 細胞滾動、粘附和遷移 T細胞,B細胞,血小板,白細胞,外周血單核細胞,嗜酸性粒細胞與內皮細胞或配體相互作用 抗炎治療
圖1 粘附分子的表達水平會影響流體剪切條件下THP1與HUVECs的粘附。 趨化作用、跨膜遷移和浸潤實驗
在癌癥和心血管疾病的產生過程中,細胞通過感知趨化分子而粘附到血管壁上,然后通過跨膜穿過內皮細胞層浸潤至特定組織。Cellix產品有助于這些過程的研究,利用Cellix注射泵和生物芯片,可以研究細胞的趨化、跨膜遷移、浸潤、癌癥和心血管疾病療法及細胞間相互作用(圖1)。 圖1 流體剪切與化學誘導刺激下黑色素瘤細胞在VenaT4芯片中的轉移。1205-Lu GFP細胞經受0.5 dyne/cm2流體剪切刺激6 min (A)與30 min (B)相比,細胞跨膜遷移能力增強,且在含有化學誘導試劑的情況下細胞跨膜遷移能力也增強(C)。 生物膜形成
細菌粘附在基底表面并且克隆化是形成生物膜的步,這會影響植入式醫療設備的效果并導致一些疾病。生物膜對宿主的免疫系統、機械清除和抗生素都有抗性。因此,闡明細菌增長的生理環境和機制非常重要。使用Cellix微流體泵和生物芯片可以模擬心血管、各種表面和腸內生物膜形成的生理微環境。例如,研究人員可以在Vena8生物芯片底部粘上玻璃基底或其它感興趣的材料來密封流道,然后將含有不同物質(如抗生素)的溶液流過,以研究剪切力或抗生素對基底上形成的生物膜的影響(圖1)。 圖1 流體剪切促使大腸桿菌由滾動向粘附狀態轉變。 5、心血管:動脈粥樣硬化、藥物支架 動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥,是心臟病和中風的主要誘因。動脈粥樣硬化的特征是在血管壁上不斷積累脂質,淋巴細胞在血管壁上的募集和向內膜的遷移是這種病理過程的核心事件。血管內支架的作用是保持動脈暢通,維持正常的血流狀態。藥物支架是一種新型支架,可以降低再狹窄的發生率,它由金屬支架及其上包被的多聚物膜組成,多聚物膜可以緩釋阻斷炎癥反應和細胞增殖的藥物,降低了術后血管愈合時組織的過度生長。Cellix化了一系列微流體設備,使其更加適于研究血液與藥物支架的相互作用(圖1)。 圖1 利用Vena8生物芯片研究不同的藥物緩釋系統對血小板在纖連蛋白包被基底上的聚集能力的影響。系統C具有好的穩定性和抗聚集能力。 6、呼吸(哮喘和慢性阻塞性肺病) 哮喘是發展中國家常見的一種慢性呼吸疾病,目前主要使用內吸式糖皮質激素來控制哮喘癥狀。嗜酸性粒細胞是哮喘肺中主要的炎癥細胞,它們釋放的胞內物會對損害呼吸道上皮,造成呼吸障礙。嗜酸性粒細胞在血管內皮的粘附和跨膜在哮喘的發病過程中起著重要作用。孟魯斯特(MLK)是一種新型的平喘藥,通過拮抗cysLT1R來減少嗜酸性粒細胞的遷移。MLK還具有抗炎作用,利用Cellix生物芯片可以方便地對此進行研究(圖1)。 圖1 在2 dyne/cm2流體剪切刺激下,經過100 nM MLK處理后,嗜酸性粒細胞明顯減少了在rhVCAM-1包被的基底上 |