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WB實驗詳細步驟及用到的相關試劑匯總

時間:2024/6/17閱讀:870
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以下是 WB 實驗的詳細步驟及相關試劑耗材匯總:


一、實驗步驟

1. 蛋白提取:使用適當的裂解液提取蛋白。
2. 蛋白定量:采用 Bradford 法或 BCA 法等測定蛋白濃度。
3. SDS-PAGE 電泳:配制分離膠和濃縮膠,上樣進行電泳。
4. 轉膜:將蛋白從凝膠轉移到 PVDF 或 NC 膜上。
5. 封閉:用封閉液封閉膜。
6. 一抗孵育:加入一抗,室溫或 4℃孵育。
7. 洗滌:用洗滌液多次洗滌膜。
8. 二抗孵育:加入相應的二抗,孵育后洗滌。
9. 顯色:使用化學發光試劑顯色,曝光并成像。

二、試劑耗材

1. 試劑:裂解液、PBS、蛋白上樣緩沖液、電泳緩沖液、轉膜緩沖液、封閉液、一抗、二抗、化學發光試劑等。
2. 耗材:移液器及槍頭、離心管、培養皿、電泳槽、轉膜裝置、PVDF 膜或 NC 膜等。

需要注意的是,具體的實驗步驟和試劑耗材可能因實驗條件和要求的不同而有所差異。在實驗過程中,要嚴格按照操作規范進行,以確保實驗結果的準確性和可靠性。


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