病毒作為形態最微小,結構最簡單的微生物,和我們的日常生活緊密相連?,F在隨著科學的發展進步,病毒也早已不只是致病源的代名詞,而是被開發出了對人類有益的用處。比如,噬菌體可以作為防治某些疾病的特效藥;在細胞過程中某些病毒可以作為細胞融合的助溶劑;在基因工程中病毒可以作為目的基因的載體,使之被拼接在目標細胞的染色體上等等。
在病毒發揮這些功能的過程中,對病毒的質量控制是非常重要的,這就需要對其進行準確高效的表征。目前常用的病毒表征方式主要有ELISA、RT-qPCR、TCID50等,主要檢測的是病毒的滴度,也就是病毒活力,以此確定病毒的感染能力。但這些方法有一個共同的缺點,那就是耗時較長,其中用時最短的RT-qPCR也要花費1-2小時。并且這些檢測方式無法得到在病毒的質量控制中十分重要的兩項參數——病毒的粒徑和濃度。在實際應用中,病毒的粒徑和濃度能為研究人員提供許多信息,比如粒徑較小的病毒可能有團聚的風險,濃度較高的病毒則往往代表了較高的感染效率等。
在介紹了這么多相關的理論知識之后,就讓我們來看一下納米庫爾特粒度儀在病毒質量控制中的表現吧。俗話說,百聞不如一見,相信這些實測數據能讓讀者們有一個更直觀的印象。
這是使用納米庫爾特粒度儀分別對純化前后的病毒收獲液進行測試所得的結果。
圖1:純化前、后的病毒收獲液測試結果
可以從圖上清晰地看出,純化前的病毒收獲液單分散性差,顆粒粒徑分布較寬,在70-140nm之間均有分布。而純化后的病毒收獲液具有較好的單分散性,顆粒粒徑分布較窄,集中在100-110nm之間。而且純化前后病毒收獲液中含量最高的顆粒粒徑也從70nm轉移到了110nm,表明在純化過程中粒徑較小的顆粒被除去,而粒徑在110nm左右的病毒顆粒被富集。
接下來讓我們看看存放溫度對病毒狀態的影響,這是使用納米庫爾特粒度儀對兩個在不同溫度下存放的病毒樣本進行測試所得的結果。其中兩個病毒樣本出自同一批次,分別在4℃和37℃的條件下各存放12小時后取出測試。
圖2:在4℃、37℃下各存放12小時的病毒樣本測試結果
測試結果顯示,在37℃下存放的病毒樣本較在4℃下存放的病毒樣本而言,濃度下降,而且大顆粒增多,這就表明在前者在存放的過程中發生了團聚,而這樣的團聚對病毒產品的質量會造成一定影響。
從上面的實測數據中可以看出,納米庫爾特粒度儀在病毒的質量控制,尤其是在對病毒的粒徑以及濃度的檢測中能夠發揮很大的作用,想必也能為今后病毒研究的發展助一份力。
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