高壓蒸汽滅菌器在密閉的蒸鍋內，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌。
高壓蒸汽滅菌器使用操作比較簡單，但是還是要注意一些細節問題
一、準備
在將滅菌器械放入前，請您先將需要滅菌的器械清洗干凈，以避免滅菌器上殘留的物質對滅菌器本身以及滅菌器械產生危害。
1、使用后應及時清洗滅菌的器械，清洗滅菌器械上附著的殘留物。推薦使用清洗機、凈化劑和蒸餾水清洗滅菌器械。
2、清洗后,建議再用清水沖洗一遍，以確保其清潔。
3、在把器械放入滅菌提藍時，請先將不同類別的器械分別放置，例如不銹鋼、碳鋼等，并且器械之間應留有適當的間隙。如果需要滅菌碳鋼器械，在放置前，在提籃上應當墊上若干層消毒紙或木棉紙，避免碳鋼和不銹鋼直接接觸。
4、試管、玻璃瓶等的滅菌應使開口向下豎直放置，以便于置換冷空氣和飽和蒸汽的進入。
5、在每個提籃內放置一個滅菌指示卡。
6、每月一次，在負載中放置生物孢子檢測指示劑，檢測滅菌效果。
7、提籃不允許超載(12kg),否則將會引起不充分的滅菌和干燥。
8、滅菌時需包裹的器械應選用透氣性好的包裝材料，例如滅菌袋、滅菌紙、薄紗織物等。
9、試管玻璃瓶等的滅菌，應使開口向下豎直放置，以便于空氣的排出和蒸汽的進入。
如果是橡膠管滅菌準備工作：
請先用溫水清洗橡膠管，然后將其放置在清潔的滅菌托盤上，同時確保管子的兩頭開口的空心管道，無任何急拐彎、扭曲、扭結等。
敷料包滅菌前的準備工作：
把敷料包垂直放在托盤上，避免與滅菌器內壁接觸。
培養基滅菌前的準備工作：
僅限用耐熱玻璃瓶，裝載量不超過1/2容積，容器封口應使用透氣性瓶塞。
二、升溫
按啟動鍵，滅菌器進入升溫行程。
2.1升溫指示燈亮(注意：必須高水位燈亮時才能進行加熱)
2.2上排數碼管顯示內室溫度，下排數碼管顯示排冷氣溫度。
2.3電熱管通電，內室開始升溫。同時冷空氣通過排冷氣溫度。
2.4當內室溫度到達設定的置換溫度(即設置好的排冷氣溫度)時，排汽閥關閉，電熱管繼續加熱。上排數碼管顯示內室溫度，下排數碼管顯示滅菌時間的數值。
三、滅菌
當內室溫度到達設定的滅菌溫度時，開始滅菌計時，計時以秒為單位遞減。
四、結束
當滅菌時間遞減為0，轉入結束。內室開始排汽，溫度下降，當內室溫度降至說明書上溫度，蜂鳴器鳴叫代表滅菌結束。壓力表指針回復“0”；
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