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| 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
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小鼠胚胎成纖維細胞MEF 種屬鑒定 安為生物
| 小鼠胚胎成纖維細胞MEF MEF【MEF】 | |
| l 細胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
| l 細胞來源 | 國家資源庫 |
| l 細胞背景 | 取孕9天的615小鼠胚胎，去除腦、心臟等培養建立。該細胞可用作飼養層細胞，支持胚胎干細胞ES的生長并維持ES未分化的狀態。當作為飼養層細胞時，MEF需經絲裂mei素C處理停止生長。建議作為ES細胞的飼養層時，MEF不要超過6代。 |
| l 細胞特性
| 1） 來源：小鼠胚胎 2） 形態：成纖維細胞樣，貼壁生長 3） 含量：>1x106 細胞數 4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途：僅供科研使用 |
| l 培養條件 | 1） 準備D/F12（推薦awcell-0005）培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。 2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。 |
| l 注意事項
| 對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法： 1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10?S的培養基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。 |
| l 運輸形式 | 低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。 常溫: （2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
| l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |
在進行ESC或iPSC的實驗時，使用MEF作為飼養層是至關重要的，因為它們能夠分泌一些細胞因子，如肝細胞生長因子（HGF）和轉化生長因子β（TGF-β），這些因子有助于抑制干細胞的分化。此外，MEF細胞在培養過程中經過滅活處理，確保它們不會增殖并干擾干細胞的生長。
選擇高質量的MEF細胞對于實驗的成功至關重要。好的MEF細胞應具備以下特點：生長停滯，確保細胞已經過滅活處理；具有高復蘇率，通常大于80%；以及對ESC/iPSC具有強大的支持能力，這可以通過觀察干細胞形態和檢測ALP表達水平來評估。
OriCell®是提供高質量MEF細胞的供應商之一，他們的產品經過預滅活處理，確保了高復蘇率和對ESC/iPSC的良好支撐能力。此外，OriCell®還提供專門針對MEF細胞優化的培養基，以保證細胞的高復蘇和貼壁效率。
值得注意的是，盡管MEF細胞在干細胞研究中非常有用，但它們也可能帶來一些挑戰，例如細胞老化和污染的風險。因此，研究人員需要仔細選擇和處理這些細胞，以確保實驗的準確性和可靠性。
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