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應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
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H9/HTLV-IIIB 人T淋巴瘤白血病細胞
【H9/HTLV-IIIB】 | |
l 細胞鑒定 | STR鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞背景 | 該細胞由19歲患有急性淋巴細胞白血病(ALL)的19歲男子的外周血建立,在1976年復發。 |
l 細胞特性
| 1) 來源:T淋巴細胞 2) 形態:淋巴細胞樣,懸浮生長 3) 含量:>1x106 細胞數 4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途:僅供科研使用。 |
l 培養條件: | 1)準備RPMI-1640(推薦iCell-0002)培養基;優質胎牛血清,10%;GlutaMAX-1谷氨酰胺( iCell-0900 ) 1%, 雙抗,1%。 2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項:
| 1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。 4)運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。 |
l 運輸形式: | 低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。 常溫(2) T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全: | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |