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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,農業,制藥 |
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【分析類型】: 夾心ELISA
【樣本類型】: 血清、血漿、細胞上清
【運輸條件】: 4℃
【靈 敏 度】: 高靈敏度
【板 式】: 96孔板,可拆
【保 存】: 試劑盒未拆開,4℃保存。已拆開,標準品-20℃保存,其它4℃保存。
動物ELISA檢測試劑盒免費代測
用途
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關生物液體中濃度。
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的抗原會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗體與結合在包被抗體上的抗原結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,抗原濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中指標的濃度。
反應類型 | 夾心法 |
規格 | 96T |
反應時間 | 4.5h |
反應性 | 通用 |
檢測方法 | Colormetric |
靈敏度 | 檢測下線除以10 |
樣本體積 | 100μL |
樣本類型 | 血清、血漿或其他相關生物液體 |
特異性 | 可檢測樣本中的指標,且與其它相關蛋白無明顯交叉反應 |
重復性 | 板內,板間變異系數均<10% |
樣品活化方法
生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測指標活性前必須進行活化處理。
活化方法如下:
血清、血漿: 280 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了10倍!
細胞培養上清:20 μL標準品&樣品稀釋液中加入100 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了2倍!
組織勻漿:1960 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻后檢測。
注意:樣品被稀釋了50倍!
精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
批內變異系數 | 批間變異系數 | |||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
數量 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
平均值( MERGEFIELD 單位ng/mL) | 0.41 | 1.07 | 4.96 | 0.47 | 1.25 | 4.24 |
標準差 | 0.02 | 0.05 | 0.22 | 0.03 | 0.06 | 0.2 |
變異系數 (%) | 4.88 | 4.67 | 4.43 | 6.38 | 4.8 | 4.72 |
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
樣本類型 | 回收率范圍 (%) | 平均回收率 (%) |
血清(n=5) | 94-110 | 102 |
血漿(EDTA)(n=5) | 90-102 | 96 |
細胞上清(n=5) | 95-106 | 98 |
線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
血清(n=5) | 血漿(EDTA)(n=5) | 細胞上清(n=5) | ||
1:2 | 回收率范圍(%) | 99-108 | 95-105 | 92-104 |
平均回收率(%) | 105 | 102 | 97 | |
1:4 | 回收率范圍(%) | 95-109 | 90-100 | 97-105 |
平均回收率(%) | 102 | 96 | 100 | |
1:8 | 回收率范圍(%) | 89-103 | 89-104 | 96-108 |
平均回收率(%) | 97 | 97 | 102 | |
1:16 | 回收率范圍(%) | 88-102 | 98-108 | 92-105 |
平均回收率(%) | 94 | 104 | 100 |
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
說明書 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1個 | 1個 |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 |
標準品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 |
酶標試劑 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 |
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
說明書 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1個 | 1個 |
說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些,請在使用時量取而非直接倒出。
動物ELISA檢測試劑盒免費代測
操作步驟
1. 標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外。
4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
9. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
試驗所需自備物品
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
我司試劑盒優勢體:
品種齊全 : 可以檢測人、小鼠、大鼠和豬的各種細胞因子
操作簡單 : 大多數試劑盒可以在3小時內完成檢測
節約樣品 : 絕大多數試劑盒的單孔樣品量只需50μl
應用廣泛 : 適用于細胞培養上清液、血清、胞漿和尿液等多種樣品
包裝多樣 : 除了1塊板的包裝,很多品種還提供2塊板和5塊板的經濟裝
超級靈敏 : 有些試劑盒采用先進檢測技術,靈敏度高
特異性高 : 進行了廣泛的非特異性排查,避免了由于交叉反應和干擾導致的實驗數據誤差
我司有專業技術團隊規范性操作,技術嚴格,質量保證,無效果直接退款退貨,我們優質低價,讓新老客戶放心和稱心的科研產品,從品質到價格到售后,在國內我們更專業,更具優勢,歡迎訂購!上海研尊生物公司是國內有名的科研抗體試劑盒供應商生產商。
公司主營業務:
試 劑 盒 : elisa試劑盒、 酶聯免疫試劑盒、試劑盒、免疫組化試劑盒、檢測試劑盒、分子生物學試劑盒
生化試劑: 原裝產品名稱進口生化試劑、進口原裝生化試劑、國產生化試劑
細 胞 : 進口細胞、國產腫瘤細胞、國產正常細胞。
抗 體 : 免疫組化、免疫熒光、流式細胞檢測、免疫細胞化學