一
常見的細胞培養基
細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營養和促使細胞生殖增殖的基礎物質,也是培養細胞生長和繁殖的生存環境。
基礎培養基(MM)
基礎細胞培養基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質。合成培養基使用時還需添加一定量的血清使細胞保持良好的生長狀態。
培養基的種類有很多,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12是應用較為廣泛的。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。具體的特征及應用如下:
完-全培養基(CM)
完-全培養基是在基礎培養基中添加了血清、抗生素等物質,也叫(血清)細胞培養基。其中大部分細胞培養常用的是牛血清,因為牛血清中含有促進細胞增殖的各種生長因子。此外為防止污染,培養液中尚需加一定量的抗生素。
完-全培養基根據添加血清量的多少,可分為細胞生長培養基和細胞維持培養基,用于不同細胞和不同研究。
無血清細胞培養基(SFM)
無血清培養基是指在合成培養基的基礎上引入成分完-全明確或部分明確的血清替代成分,主要是由基礎培養基和添加物(替代血清的補充因子)組成。其主要成分為下列幾種:
黏附因子
約有80%的細胞是屬于貼附型生長。一般的細胞培養基是利用血清作為其來源,在無血清培養基中,細胞黏附因子就是很重要的物質。
生長因子
生長因子是維持細胞活性與促進細胞增生、遷移、分化等,不可-或缺的要素。
酶抑制劑
貼附型細胞一般多以胰蛋白酶(trypsin)進行傳代。在一般細胞培養中,血清中含有抑制trypsin的成分,所以無血清培養基必須添加trypsin抑制劑。
細胞轉入無血清培養之前,要留有種子細胞,種子細胞按常規培養于含血清的培養基中,以保證細胞的特性不發生變化。
優點
1 | 未知組分少; |
2 | 避免血清對細胞的毒性作用和血清源性污染; |
3 | 雜蛋白含量少,避免血清成分影響研究結果或是產品制程,提高產品表達水平并易于純化。 |
缺點
1 | 無血清培養基成本較高; |
2 | 不是所有的細胞都能在無血清培養基中培養; |
3 | 細胞在無血清培養基中易受某些機械因素和化學因素的影響,培養基保存和應用方面局限性很大。 |
二
細胞培養基的選擇
細胞培養基的種類很多,如何選擇適宜的培養基是細胞培養的關鍵。在此提供以下建議可供參考:
1
如果是新購買的細胞,可以向細胞株的廠家咨詢,或者詢問引種來源查找細胞庫上對應的培養基;
2
根據細胞的特點及實驗的需要來選擇培養基;
3
自己試驗,用多種培養基培養細胞,做生長曲線,記錄細胞的生長速度,觀察細胞的形態變化,根據實驗結果選擇最佳培養基。
培養基種類和細胞系并不是一個強制的對應關系。具體培養細胞使用什么培養基,主要還是根據數據庫、文獻和經驗哦!
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