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CAS:60842-46-8;渝偲醫藥葡聚糖-熒光素-試劑說明

時間:2023/1/9閱讀:182
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葡聚糖FITC


Dextran-FITC、葡聚糖-熒光素、(葡聚糖-FITC)

CAS NO: 60842-46-8

英文名稱:: Dextran(3,6'dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H],9-[9H]xanthen]-5(or 6]-yl]carbamothioate, average Mw of approximately

分子量:4000, 5000, 6000, 7000, 9000, 10000, 20000, 40000, 70000等等,最高可做到2000k。


溶劑:易溶于水或鹽溶液,也溶于DMSO,甲酰胺和某些其他極性有機溶劑,不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺(DMF)


性狀:黃色固體粉末

穩定性:保持密封干燥,冷藏保存,避免反復凍融。

FITC標記葡聚糖(FITC-Dextran)是以天然葡聚糖B512F限制水解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為底物,經熒光素標記所得的合成探針。熒光素基團通過一個穩定的硫代氨甲酰健連接到葡聚糖上,此標記步驟不會引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran內每個葡萄糖單位含0.002~0.008 mol FITC,這一低水平的替換確保葡聚糖最小的結構變化,這一特性對滲透性研究來說是最基本需求。

FITC標記葡聚糖(FITC-Dextran)廣泛用于微循環和細胞通適性研究,通過熒光顯微測定法來檢測。還可用于植物細胞壁多孔性和毛細血管通透性研究。血漿蛋白不會結合FITC-Dextran。

FITC標記葡聚糖(FITC-Dextran)還可以用于心血管、微循環、灌注、細胞單層和細胞膜滲適性研究,作為一種熒光流動示蹤化合物,來支持對血流、膜損傷、血管引流和腎清除等過程的測定。FITC-Dextran40可能用于研究細胞內吞行為。也可能用于研究內皮單細胞層孔隙度和細胞層內頂端到基底膜的運動。

本材料是對平均分子量約4kDa葡聚糖進行標記的熒光素衍生物,即異硫 酸熒光素葡聚糖4(fluorescein isothiocyanate dextran 4,FITC-dextran,FD4),以凍干粉形式提供,易溶于水,最大激發和發射波長分別為493和520nm。

綜合各種溶液體系和溫度下FITC-Dextrans的穩定性測定,總的來說,體內外FITC-Dextrans的穩定性非常優秀。僅當pH>9和上升溫度內熒光素可能存在水解的風險。兔血漿、[**]勻漿液、肝臟勻漿液和尿液內的FITC-Dextrans在37°℃,至少3天內保持穩定,分子量不會發生變化,且末發現熒光素基團的釋放。6%三氯yi酸內FITC-Dextrans室溫穩定保存3天。【文獻來源:P.Kurtzhals,C.Larsen and M.Johansen,High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

硫代氨甲酰鍵的水解產生4-或5-氨基熒光素,能立即被HPLC定量檢測到。未發表的研究數據顯示,將高壓處理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃長達5個月,發現僅在50℃情況下可能觀察到微量(1%)的自由氨基熒光素含量增加。單獨進行高壓處理會引起2.7%的自由氨基熒光素產生。

其他的未發表研究顯示,FITC-Dextran在pH4溶液35℃內能穩定保存高達1年。而在pH4,80℃內硫代氨甲酰鍵穩定30min,可能觀察到葡聚糖的降解。pH9,35℃內存放一個月以上會發生一定量(24%)的熒光衰減。

一些研究證明,FITC-Dextrans在持續性實驗(1-6天)的體內穩定性。【文獻來源:N.Thorball,FITC-dextran tracers in microcirculatoryand permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.]



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