BD流式細胞儀的工作原理
閱讀:677 發布時間:2023-2-13
BD流式細胞儀采用流式細胞術是一種對處在液流中的細胞或其它生物微粒如細菌)逐個進行多參數的快速定量分析和分選的技術。
工作原理是:將待測細胞經特異性熒光染料染色后放入樣品管中,在氣體的壓力下進入充滿勒液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,形成細胞柱。該設備通常以激光作為發光源。經過聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上,被熒光染色的細胞在激光束的照射下,產生散射光和激發熒光。這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進行檢測,這種信號基本上反映了細胞體積的大小;熒光信號的接受方向與激光束垂直,經過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個不同波長的熒光信號。這些熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內物質的濃度,經光電倍增管接收后可轉換為電信號,再通過模/數轉換器,將連續的電信號轉換為可被計算機識別的數字信號。計算機把所測量到的各種信號進行計算機處理,將分析結果顯示在計算機屏幕上,也可以打印出來,還可以數據文件的形式存儲在硬盤上以備日后的查詢或進一步分析。
本公司提供的二手BD流式細胞儀具有高度的熒光測量靈敏度,一般以能檢測到單個微球上少標有FITC或PE熒光分子數目來表示,一般現在FCM均可達到<600個熒光分子。