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Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector
Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector
Dnmt1染色體體的小尺寸可產生高信噪比,以產生令人震驚的高分辨率圖像或染色質甲基化動力學的定時電影。值得注意的是,它對甲基化模式沒有影響,并且在大多數細胞類型中均表現出極低的毒性。只需用Dnmt1 Chromobody質粒轉染您選擇的細胞系即可。該質粒包含與TagRFP或TagGFP(Evrogen)融合的Dnmt1特異性羊駝抗體的序列。轉化后,您的細胞將表達Dnmt1染色體抗體。由于熒光體分子特異地定位于DNA甲基轉移酶,因此細胞核將發出擴散和點狀的熒光。
Dnmt1染色體在細胞中的實時可視化
用Dnmt1-Chromobody質粒轉染HeLa細胞,并在生長和分裂過程中對其進行觀察。每30分鐘對細胞成像24小時。抗Dnmt1-TagRFP染色體抗體將DNA甲基轉移酶與細胞核結合。在G期細胞中,信號通過細胞核和細胞質均勻分布。隨著時間的流逝,在S期,顆粒以復制灶的形式出現在細胞核中,后顆粒消失,細胞分裂。
在整個細胞周期中,Dnmt1-Chromobody轉染HeLa細胞的靜態圖像。這次,使用抗Dnmt1-TagGFP融合蛋白,隨著細胞通過S期,復制灶的形成可以看成亮綠色的點。Dnmt1-Chromobody不影響正常細胞功能。
染色體將您的細胞變成免疫報告工廠
納米抗體是*的小抗體片段,表現出與靶蛋白的超高效結合。在動物細胞中表達的納米抗體可以被收集并用于體外研究。當納米抗體表達為與報告分子(例如GFP)的融合體時,發生了一些出乎意料的事情。新形成的染色體抗體直接與目標細胞內的靶標結合。而且,使用正確的載體和啟動子,結合具有高特異性和低背景。這為GFP-融合與感興趣的蛋白質的免疫定位研究提供了*的選擇。為什么?因為已經顯示了GFP和RFP融合可以阻斷或改變融合蛋白的活性。相反,