詳細介紹
產品簡介
OmniMax 2 T1 來源于大腸桿菌 K12,經過改良后適用于所有的克隆應用,包括 Gateway 技術。此
外,OmniMax 2 T1 還能有效轉化高度甲基化的 DNA。由于該菌株攜帶 tonA 基因突變,因此對 T1
和 T5 噬菌體感染具有抗性。經 pUC18 質粒轉化檢測,OmniMax 2 T1 感受態細胞的轉化效率可達
109 cfu/μg DNA 以上。
產品組成
組分
OmniMAX 2 T1
感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F' proAB lacIq lacZΔM15 Tn10 (TetR) Δ(ccdAB) mcrA Δ(mrr hsdRMS-mcrBC) φ80(lacZ)ΔM15 Δ(lacZYA-argF)
U169 endA1 recA1 supE44 thi-1 gyrA96 relA1 tonA panD
存儲條件
-80 ℃保存,請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
產品特性
-不能用于高通量克隆;能夠轉化大于 20kb 的載體;
-不能用于擴增慢病毒、腺病毒載體;
-對 T1 型和 T5 型噬菌體有抵抗力。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥109 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37℃預熱),然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔