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詳細介紹
產(chǎn)品簡介
Stbl4 電轉(zhuǎn)化大腸桿菌細胞是 Stbl2 細胞的衍生物，非常適合克隆不穩(wěn)定插入物，如逆轉(zhuǎn)錄病毒序列、
直接重復(fù)序列和串聯(lián)陣列基因。此外， Stbl4 細胞可用于使用質(zhì)粒衍生載體產(chǎn)生 cDNA 文庫，并能
夠吸收和維持大質(zhì)粒(例如 50kb 粘粒和 100 - 200 kb P1 克隆)。Stbl4 細胞還含有一個 F’附加體，允
許它們作為單鏈 DNA 的宿主，如 M13mp 克隆載體。由于攜帶 lacZΔM15 突變，因此該菌可用于含
Xgal 和 IPTG 的瓊脂平板上菌落的藍/白斑篩選。mcrA 突變和 mcrBC - hsdRMS - mrr 缺失允許克隆甲
基化的基因組序列。最后，endA1 突變大大提高了質(zhì)粒產(chǎn)量和質(zhì)量。經(jīng) pUC18 轉(zhuǎn)化檢測，Stbl4 感
受態(tài)細胞的效率可達 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Stbl4
感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 galthi-1 supE44 λ- relA1 Δ(lac-proAB)/F' proAB+lacIqZΔM15
Tn10 (TetR)
存儲條件
-80 ℃保存，請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90 s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養(yǎng)基（室溫或37 ℃預(yù)熱），然后置于37 ℃搖床復(fù)壯45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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