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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介
XL1-Blue MRF'Kan 菌株來源于 XL1-Blue 株系，屬于限制酶系統(tǒng)缺失型菌株，且具有卡那m素抗性
(KanR)。recA1和endA1基因的突變有利于插入外源DNA片段的穩(wěn)定性和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
hsdR17 突變導(dǎo)致 EcoK 核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失，同樣提高了外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。
lacIqZΔM15 的存在使 XL1-Blue MRF’Kan 菌株可用于藍(lán)、白斑篩選實驗。XL1-Blue MRF'Kan 感受
態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
XL1-Blue MRF' Kan
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：?(mcrA)183 ?(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac [F'proAB
lacIqZ?M15 Tn5 (KanR)]
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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