產(chǎn)品簡介
XL1-Red 具有良好的重組能力(recA+),但在豐富培養(yǎng)基(如 LB)中生長極慢,繁殖時(shí)間為 90-
120 min。XL1-Red 攜帶編碼四環(huán)素抗性基因的 TN10 轉(zhuǎn)座子;因此,產(chǎn)生的轉(zhuǎn)化物可能不具有四
環(huán)s抗性。然而,由于快速的突變型,細(xì)胞將經(jīng)常產(chǎn)生四環(huán)s敏感(Tets)變體。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)
化檢測,XL1-RED 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 106 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
XL1-RED
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 relA1 lac mutD5 mutS mutT Tn10 (TetR)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥106 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔