詳細介紹
產品簡介
ArcticExpress (DE3)來源于 E. coli B 菌株,為 Lon 和 OmpT 蛋白m缺陷型菌株,可促進表達蛋白的
穩定。ArcticExpress (DE3)菌株染色體 DNA 中整合了λ噬菌體 DE3 區,使得 ArcticExpress (DE3)菌
株可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,廣泛用于 pET 系列,pGEX,pMAL 等質粒
的蛋白表達。ArcticExpress (DE3)菌株具有四環s,慶大m素抗性,endA1 突變有利于質粒 DNA 的
穩定。[cpn10cpn60 GentR]的存在使 ArcticExpress (DE3)可以表達適應低溫的伴侶蛋白 Cpn10 和
Cpn60(來自嗜冷菌—Oleispira antarctica)。Cpn10 和 Cpn60 伴侶蛋白在 4 - 12 ℃表現出較高活性,
在 ArcticExpress (DE3)細胞中表達時,可降低重組蛋白包涵體的形成,增加可溶重組蛋白的表達量
及生物活性,比傳統的原核表達伴侶蛋白 GroEL、GroES 等具有更加優異的促融性能。吐露港生產
的 ArcticExpress (DE3)感受態細胞經特殊工藝制作,pUC18 質粒檢測轉化效率達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
ArcticExpress(DE3)
感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:E. coli B F– ompT hsdS (rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR]
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。