詳細介紹
產品簡介
B834 是 BL21 菌株的父系菌株。該系列宿主菌是蛋氨s缺陷型,可以用來高水平、高特異性地使用
35S-蛋氨s和硒代蛋氨s來標記目的蛋白,以用于蛋白質晶體結構的研究。B834 宿主菌也是 Lon 和
OmpT 蛋白m缺陷型菌株。B834 (DE3)菌株可表達 T7 RNA 聚合酶,因此適用于 pET 系列及其他 T7
啟動子系列的載體。經 pUC18 質粒轉化檢測,B834 (DE3)感受態細胞的轉化效率可達 107 cfu/μg
DNA。
產品組成
組分
B834 (DE3)
化學感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm met (DE3)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。