詳細介紹
DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫,所以其特點主要包括以下:(1)氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;(2)維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍;3)含有糖酵解途徑中的重要物質--丙酮酸;(4)含有微量的鐵離子。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應用1廣泛的培養(yǎng)基。其他 如 M199 、 IMDM 、 L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。其具體的特征及應用如下:
RPMI 1640培養(yǎng)基(2X)1、BME細胞培養(yǎng)基
基礎Eagle培養(yǎng)基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle設計,BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡單、便于添加,適于各種傳代細胞系和特殊研究用,在此基礎上改良的細胞培養(yǎng)基品種有MEM、DMEM、IMDM等。
2、MEM細胞培養(yǎng)基
又稱*Eagle培養(yǎng)基(Minimal Essential Medium),1959年在Eagle's基礎培養(yǎng)基(BME)上修改而來,刪去賴氨酸、生物素,氨基酸濃度增加,適合多種細胞單層生長,有可高壓滅菌品種,是一種1基本、試用范圍的培養(yǎng)基,但因其營養(yǎng)成分所限,針對生產之特定細胞培養(yǎng)與表達時,并不一定是使用效果或者的培養(yǎng)基。
3、DMEM細胞培養(yǎng)基
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。1初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng),也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養(yǎng)。例如CHO細胞表達生產乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。
4、IMDM細胞培養(yǎng)基 RPMI 1640培養(yǎng)基(2X)
Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium,用于培養(yǎng)紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,LPS刺激的B細胞,骨髓造血細胞,T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng)。
5、RPMI-1640細胞培養(yǎng)基 RPMI1640培養(yǎng)基(gibco原料生產)
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,針對淋巴細胞培養(yǎng)設計,含BSS+21種氨基酸+維生素11種等。現(xiàn)也用于懸浮細胞培養(yǎng),如哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養(yǎng),其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。
6、HamF10細胞培養(yǎng)基
1963年Ham設計,含微量元素,可在血清含量低時用,適用于克隆化培養(yǎng)。F10適用于倉鼠、人二倍體細胞,特適于羊水細胞培養(yǎng)。
7、DMEM/F12細胞培養(yǎng)基
Ham's F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的,現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物,這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)。由于營養(yǎng)成分豐富,且可以使用較少血清,故也常作為無血清培養(yǎng)基的基礎培養(yǎng)基。
8、M199細胞培養(yǎng)基
1950年Morgan等設計的具有確定化學成分的細胞培養(yǎng)液,即M-199。除BSS外,含有53種成分,為全面培養(yǎng)基,主要用于雞胚成纖維細胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞,并能培養(yǎng)轉染的細胞。現(xiàn)廣泛用于病毒學、疫苗生產。
9、McCoy5A培養(yǎng)基
1959年MeCoy為肉瘤細胞設計,BSS+40種成分。可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長,除適于一般的原代細胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。
10、L15 細胞培養(yǎng)基
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤
RPMI1640培養(yǎng)液 | 含2000mg/L D-葡萄糖,300mg/L L-谷氨酰胺, 2000mg/L碳酸氫鈉。 pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥58.00 |
RPMI1640培養(yǎng)液 | 含2000mg/L D-葡萄糖,300mg/L L-谷氨酰胺, 2000mg/L碳酸氫鈉。青霉素100U/ml,鏈霉素100μg/ml 。 pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥75.00 |
RPMI 1640培養(yǎng)液 | 含110mg/L丙酮酸鈉,292mg/L L-谷氨酰胺,2000mg/L D-葡萄糖, 2000mg/L碳酸氫鈉。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥150.00 |
RPMI 1640培養(yǎng)液 | 含110mg/L丙酮酸鈉,292mg/L L-谷氨酰胺,2000mg/L D-葡萄糖, 2000mg/L碳酸氫鈉。青霉素100U/ml,鏈霉素100μg/ml 。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥180.00 |
RPMI 1640培養(yǎng)液 | 含1mM丙酮酸鈉,2mM L-谷氨酰胺,4500mg/L D-葡萄糖,10mM HEPES,1500mg/L碳酸氫鈉。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥180.00 |
RPMI 1640培養(yǎng)液 | 含1mM丙酮酸鈉,2mM L-谷氨酰胺,4500mg/L D-葡萄糖,10mM HEPES,1500mg/L碳酸氫鈉。青霉素100U/ml,鏈霉素100μg/ml 。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥180.00 |
RPMI 1640培養(yǎng)液(β-巰基乙醇) | 含1mM丙酮酸鈉,300mg/L L-谷氨酰胺,50μ m/L β-巰基乙醇,10mM HEPES,2000mg/L碳酸氫鈉。pH值7.0-7.2。 | 500 ml | ¥180.00 |
RPMI 1640培養(yǎng)液(β-巰基乙醇) | 含1mM丙酮酸鈉,300mg/L L-谷氨酰胺,50μ m/L β-巰基乙醇,10mM HEPES,2000mg/L碳酸氫鈉。青霉素100U/ml,鏈霉素100μg/ml 。pH值7.0-7.2。 | 500 ml | ¥190.00 |
RPMI 1640培養(yǎng)液(2X) | 含600mg/L L-谷氨酰胺,4000mg/L D-葡萄糖, 2000mg/L碳酸氫鈉。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥180.00 |
RPMI1640培養(yǎng)液(1.5G/L碳酸氫鈉) | 含4500mg/L D-葡萄糖,2mM L-谷氨酰胺, 1500mg/L碳酸氫鈉。 pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥180.00 |