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詳細(xì)介紹
操作步驟:
1）活化素Aelisa試劑盒使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3）加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8）取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值。
試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照進(jìn)行，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時(shí)，可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解；
補(bǔ)體的控制方法：
①用EDTA稀釋標(biāo)本；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過長或凝固不全等；
控制方法：采血時(shí)規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標(biāo)本時(shí)采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存；保存時(shí)間不宜過久，檢測時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本；對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優(yōu)點(diǎn)：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
anti- ALG13 antibody大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒
anti- ALG5 antibody大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒
anti- ALG6 antibody大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒
anti- ALK,CD246 antibody大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒
anti- ALK,CD246 antibody大鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒
anti- ALKBH1 antibody大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
anti- ALKBH3 antibody大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒
anti- ALKBH4 antibody大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
anti- ALKBH5 antibody大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
anti- ALKBH7 antibody大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒
anti- ALLC antibody大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
anti- alpha 1 Antichymotrypsin/AACT antibody大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒
anti- alpha 1 Antichymotrypsin/AACT antibody大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒
anti- Alpha actin antibody大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒
anti- Alpha actin antibody大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒
活化素Aelisa試劑盒大鼠Caspase-2(rat Caspase-2)Human IFI44(Interferon-induced protein 44) ELISA Kit
Human FEM1A(Protein fem-1 homolog A) ELISA Kit
大鼠Caspase-3(rat Caspase-3)Human SORCS1(VPS10 domain-containing receptor SorCS1) ELISA Kit
Human C1orf106(Uncharacterized protein C1orf106) ELISA Kit
大鼠Caspase-9(rat Caspase-9)Human DKKL1(Dickkopf-like protein 1) ELISA Kit
Human TRIM22(E3 ubiquitin-protein ligase TRIM22) ELISA Kit
大鼠Caspase-13(rat Caspase-13)Human PRSS22(Brain-specific serine protease 4) ELISA Kit
Human B7H6(B7 homolog 6) ELISA Kit
大鼠膽囊收縮素(rat CCK-8)Human WNT10A(Protein Wnt-10a) ELISA Kit
Human RGS19(Regulator of G-protein signaling 19) ELISA Kit
大鼠二級淋巴組織趨化因子(rat CCL21)Human ZFP36(Tristetraprolin) ELISA Kit
Human WNT7B(Protein Wnt-7b) ELISA Kit
大鼠趨化因子受體6(rat CCR6)Human WNT7A(Protein Wnt-7a) ELISA Kit
Human WNT10B(Protein Wnt-10b) ELISA Kit
大鼠趨化因子受體7(rat CCR7)Human TTF2(Transcription termination factor 2) ELISA Kit
Human TCF7L2(Transcription factor 7-like 2) ELISA Kit
大鼠粘附分子CD44 (rat CD44)Human TBX21(T-box transcription factor TBX21) ELISA Kit
Human KCNJ10(ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10) ELISA Kit
大鼠Chemerin(rat Chemerin)Human SORL1(Sortilin-related receptor) ELISA Kit
Human RPL13(60S ribosomal protein L13) ELISA Kit
大鼠肌酸激酶(rat CK)Human REPS2(RalBP1-associated Eps domain-containing protein 2) ELISA Kit
Human HSD17B10(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase type-2) ELISA Kit
大鼠肌酸激酶同工酶(rat CK-MB)Human RAB10(Ras-related protein Rab-10) ELISA Kit
Human LILRB4(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit
大鼠Clusterin(rat Clusterin)Human PPP1R14B(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 14B) ELISA Kit
Human LPPR4(Lipid phosphate phosphatase-related protein type 4) ELISA Kit
大鼠II型膠原蛋白(rat Collagen II)Human NBR1(Next to BRCA1 gene 1 protein) ELISA Kit
Human ILVBL(Acetolactate synthase-like protein) ELISA Kit
大鼠II型膠原C端肽(rat CTX-II)Human HIST2H2BE(Histone H2B type 2-E) ELISA Kit
Human DNAH17(Dynein heavy chain 17, axonemal) ELISA Kit
測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上，以便 不時(shí)觀察，待對照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
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