詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
磷酸化A-Raf抗體 | 50ul、100ul、200ul | CS-A3721 |
商品詳情:
英文名稱:phospho-A Raf (Ser214)
別 名:A raf 1; A Raf proto oncogene serine/threonine protein kinase; ARAF 1; ARAF; ARaf proto oncogene serine/threonine protein kinase; ARAF1; Oncogene Araf1; Oncogene PKS2; PKS 2; PKS; PKS2; Proto oncogene Pks; RAFA 1; RAFA1; Ras binding protein DA Raf; v raf murine sarcoma 3611 viral oncogene homolog; v raf murine sarcoma 3611 viral oncogene homolog 1; v raf oncogene homolog 1 (murine sarcoma 3611 virus); ARAF_HUMAN.
產品類型磷酸化抗體
研究領域:腫瘤 細胞生物 染色質和核信號 神經生物學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶 G蛋白偶聯(lián)受體
抗體來源:Rabbit
克隆類型:Polyclonal
交叉反應:Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, )
產品應用:ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量:67kDa
細胞定位:細胞漿
性 狀:Liquid
濃 度:1mg/ml
免 疫 原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human A Raf around the phosphorylation site of Ser214: ST(p-S)TP
亞 型:IgG
純化方法:affinity purified by Protein A
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
Function:
Involved in the transduction of mitogenic signals from the cell membrane to the nucleus.
實驗原理 :
(1)公司產品僅用于科研特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
一抗和二抗的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結合。
第二抗體是能和抗體結合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體。也就是說,抗原進入機體刺激機體免疫系統(tǒng)產生免疫應答,由B細胞可以產生與相應抗原發(fā)生特異性結合的特殊蛋白質。
一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團,而且一抗可以至少結合兩種其他基團(底物和二抗)。
一抗:可以特異結合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結合,并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團),則不需要二抗。但這樣成本很高,因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設計一般是二抗帶上可檢測標記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當一抗結合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
公司正在出售的產品:
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抗體的標記實驗要點:
1.如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及基,也可與糖基共價結合;
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的會對化抗體與親和素的結合產生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。