詳細介紹
標本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測。
4、其它生物標本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品名稱:小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAELISA試劑盒
英文名稱: EMA IgA ELISA Kit
規(guī)格 :48T/96T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA英文名稱:EMA IgA ELISA Kit產(chǎn)品別名:小鼠EMA IgA elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
公司采用全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照進行生產(chǎn),已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
以下是小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAELISA試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
CXCL10/IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗原人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試盒
CX3C趨化因子受體1抗原人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA試盒
配體1抗原人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試盒
間隙連接蛋白36抗原人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA試盒
間隙連接蛋白32抗原人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA試盒
心肌肌鈣蛋白人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試盒
CTLA-4/CD152 淋巴細胞相關(guān)抗原4/細胞性T細胞抗原-4人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試盒
C端結(jié)合蛋白1抗原人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試盒
細胞衰老抑制基因抗原人心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試盒
二嘧啶酶樣2CRMP2抗原人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)ELISA試盒
降鈣素受體樣蛋白抗原人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA試盒
N端人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試盒
C端人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)ELISA試盒
促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試盒
促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試盒 5,7-二羥基-2,2-二基-4H-1,3-苯并二氧雜環(huán)己-4-ELISA Kit for Human VPS10 domain-containing receptor SorCS1
4,5-二基嘧啶人NAD依性脫酰酶sirtuin-1(SIRT1)ELISA試盒
1-芐基-2-基咪唑ELISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-1
4--3-氟苯酸人絲酸/蘇酸蛋白激酶SIK2(Serine/threonine-protein kinase SIK2)ELISA試盒
4--1H-唑-3-酸ELISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase SIK2
3-氧基-4-苯人山梨糖和SH3結(jié)構(gòu)域包含蛋白1(SORBS1)ELISA試盒
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAELISA試劑盒2--5-氧基苯ELISA Kit for Human Sorbin and SH3 domain-containing protein 1
1-異基嗪人睪丸蛋白聚糖2(Testican-2)ELISA試盒
1-(四-2H-喃-4-基)ELISA Kit for Human Testican-2
1-基-1h-咪唑-4-磺酰人β半乳糖苷α-2,6唾液酸轉(zhuǎn)移酶1(Alpha 2,6-ST 1)ELISA試盒
2,6-二氟苯ELISA Kit for Human Beta-galactoside alpha-2, 6-sialyltransferase 1
4-氧基-3-基苯胺人開關(guān)相關(guān)蛋白70(SWAP70)ELISA試盒
2-羥基-3-基-5-氟啶ELISA Kit for Human Switch-associated protein 70
7-氮雜吲哚-2-羧酸人SUMO活化酶亞基1(SAE1)ELISA試盒
5--2-苯酚ELISA Kit for Human SUMO-activating enzyme subunit 1
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。