詳細介紹
標本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測。
4、其它生物標本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品名稱:小鼠可溶性瘦素受體ELISA試劑盒
英文名稱: sLR ELISA Kit
規(guī)格 :48T/96T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
小鼠可溶性瘦素受體英文名稱:sLR ELISA Kit產(chǎn)品別名:小鼠sLR elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
公司采用全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照進行生產(chǎn),已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
以下是小鼠可溶性瘦素受體ELISA試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
生長分化因子8抗原人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試盒
生長終止特異性同源盒基因抗原人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試盒
GATA結(jié)合蛋白4抗原人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試盒
GATA結(jié)合蛋白3抗原人皮膚淋巴細胞相關(guān)抗原(CLA)ELISA試盒
抗原人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試盒
Gamma-Synuclein/SNCG 核突觸蛋白-γ抗原人骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試盒
Galanin 神經(jīng)節(jié)肽人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試盒
生長抑制DNA損傷基因153抗原人c-sis ELISA試盒
谷酸脫羧酶-67抗原人晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試盒
γ1基酸A型受體α1抗原人晶體蛋白α(Cryα)ELISA試盒
γ1基酸A型受體B2抗原人冷球蛋白(CG)ELISA試盒
GABA/KLH γ1基酸偶聯(lián)血藍蛋白人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試盒
GABA/BSA γ1基酸偶聯(lián)牛血清白蛋白人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試盒
階段特異性胚胎表面抗原-1抗原人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試盒
FUCA1/Alpha L fucosidase I peptide α-L巖藻糖苷酶抗原人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試盒 匹伐他汀鈣ELISA Kit for S-Adenosyl methionine
6--3,4-二-2H-異喹啉-1-人內(nèi)皮細胞標記蛋白1ELISA試盒
2-基-6-苯腈ELISA Kit for Human 14-3-3 protein sigma
2-三氟基-4-基啶人分選微管連接蛋白1 (SNX1)ELISA試盒
順-六異吲哚林ELISA Kit for Human Sorting nexin-1
小鼠可溶性瘦素受體ELISA試劑盒阿卡他定人源性激肽釋放酶結(jié)合蛋白 ELISA試盒
4-咪唑啶ELISA Kit for Human Kallistatin
3-苯基芐基人神經(jīng)元特異性蛋白3(Neuronal-specific septin-3)ELISA試盒
Nα-Fmoc-Nε-生物素-L-酸ELISA Kit for Human Neuronal-specific septin-3
Y-27632人突觸相關(guān)膜蛋白25(SNAP-25)ELISA試盒
[4-(反-4-N-基環(huán)己基)苯基] 酸ELISA Kit for Human Synaptosomal-associated protein 25
1-Boc-3-羥基啶人蔗糖轉(zhuǎn)運因子SWEET1(SWEET1)ELISA試盒
六基鈷(III)酸鈉ELISA Kit for Human Sugar transporter SWEET1
四苯基卟啉鎂人ADP/ATP移位酶1(ADP/ATP translocase 1)ELISA試盒
Cy5-N-羥基琥珀酰亞胺酯ELISA Kit for Human ADP/ATP translocase 1
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。