詳細介紹
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基,用于食品、病人糞便樣品中志賀氏菌的快速檢測。志賀氏菌顯白色或無色,有些宋內氏志賀氏菌有藍色中心;大腸桿菌和大腸菌群顯綠色或黃色;沙門氏菌顯黃色或無色并有黑色中心;其它細菌顯藍綠色或黃色。變形桿菌和銅綠假單胞菌基本不生長;是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。
成份 (g/L)
特殊營養(yǎng)物質 | 70.2 |
混合顯色劑 | 0.4 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 7.3±0.1 25℃ |
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結果。
注意
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。
用法
稱取本品 17.12g 加入200ml蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱1分鐘左右。冷卻至45-50℃時,傾入無菌平皿。
注意:制備好的培養(yǎng)基注意保持表面干燥,可在36±1℃的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時。
貯存
制備好的平板可保存 2-5 天,應避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1、按GB標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取25克樣品液加入225ml GN增菌液或志賀氏菌增菌肉湯中,按標準規(guī)定時間增菌培養(yǎng); 3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液,劃線接種到志賀氏菌顯色培養(yǎng)基上,做2個平板;
4、36±1℃培養(yǎng)20-24h,志賀氏菌顯白色或無色,有些宋內氏志賀氏菌有藍色中心;大腸桿菌和大腸菌群顯綠色或黃色;沙門氏菌顯黃色或無色并有黑色中心;其它細菌顯藍綠色或黃色。變形桿菌和銅綠假單胞菌基本不生長;
5、對典型菌落做全套生化試驗和志賀氏菌血清學試驗。
質量控制
1 、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈灰白色至淡粉色。制備好的平板呈紅色固體培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗
在 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 20 ~ 24h 小時:
質控菌株 | 菌株號 | 生長情況 | 菌落顏色 |
福氏志賀氏菌 | ATCC12022 | +++ | 白色或無色,菌落直徑1-3mm |
痢疾志賀氏菌 | CMCC51252 | +++ | 白色或無色,菌落直徑1-3mm |
鮑氏志賀氏菌 | CMCC51582 | +++ | 白色或無色,菌落直徑1-3mm |
宋內氏志賀氏菌 | CMCC 51592 | +++ | 白色或無色,菌落直徑1-3mm,有藍色中心 |
金黃色葡萄球菌 | ATCC25923 | - | / |
大腸桿菌 | ATCC25922 | +++ | 綠色菌落 |
沙門氏菌 | ATCC14028 | +++ | 無色菌落且黑色中心 |
奇異變形桿菌 | ATCC12453 | -/+ | 無色,菌落直徑<1mm |
肺炎克雷伯氏菌 | ATCC10031 | ++ | 綠色菌落 |
弗氏檸檬酸鹽桿菌 | ATCC43864 | +++ | 綠色菌落 |
銅綠假單胞菌 | CICC10211 | -/+ | 無色,菌落直徑<1mm |
方法的局限性
本培養(yǎng)基上的典型志賀氏菌必須做生化試驗或血清學試驗。
檢驗原理:
利用非志賀氏菌的特異性的酶,使其與酶底物結合形成不同顏色的菌落,而生化特性反應不活躍的志賀氏菌經22~28h培養(yǎng)后,則形成易于識別的白色-粉紅色(與培養(yǎng)基顏色相近)的菌落。志賀氏菌呈白色/清晰的菌落,大小約為1~3mm,周圍培養(yǎng)基變紅。
典型特征
志賀氏菌顯白色或無色,有些宋內氏志賀氏菌有藍色中心;大腸桿菌和大腸菌群顯綠色或黃色;沙門氏菌顯黃色或無色并有黑色中心;其它細菌顯藍綠色或黃色。變形桿菌和銅綠假單胞菌基本不生長。
不同細菌在志賀氏菌顯色培養(yǎng)基上的生長特征:
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福氏志賀氏菌CMCC51572 白色或無色,菌落直徑1-3mm | 痢疾志賀氏菌CMCC51105 白色或無色,菌落直徑1-3mm | 宋內志賀氏菌CMCC51592 白色或無色,菌落直徑1-3mm,有藍色中心 |
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大腸埃希氏菌ATCC25922 綠色菌落 | 肺炎克雷伯氏菌ATCC10031 綠色菌落 |