用途:用于綠膿桿菌的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn)。
成分(g/L):
Pancreatic Digest of Gelatin/明膠蛋白胨 | 20.0 |
Anhydrous Magnesium Chloride/氯化鎂 | 1.4 |
Anhydrous Potassium Sulfate/硫酸鉀 | 10.0 |
Agar/瓊脂 | 15.0 |
pH值7.2 ± 0.2 | 25℃ |
檢驗(yàn)原理:
蛋白胨和甘油提供碳氮源;氯化鎂和硫酸鉀促進(jìn)綠膿色素和熒光素的產(chǎn)生;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
用法:
Suspend 46.4g of the medium in one liter of purified water containing10g of glycerol. Heat , with frequent agitation, and boil for 1 minute. Autoclave 15 min at 121°C.
稱(chēng)取本品 46.4g,另稱(chēng)取 10g甘油,加熱煮沸溶解于1000ml蒸餾水中,分裝 ,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。
綠膿菌素生成試驗(yàn)方法及原理:
方法:挑取可疑菌落接種在在綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基(PDP)斜面上,培養(yǎng)24小時(shí),觀察斜面有無(wú)色素。如有色素,在試管內(nèi)加氯仿3.0~5.0mL,充分震搖,使培養(yǎng)物中的綠膿菌素提取在氯仿中,待氯仿提取液呈現(xiàn)綠色時(shí),加1mol/L鹽酸約1mL,震搖后靜置片刻,上層鹽酸溶液中呈現(xiàn)粉紅至紅色實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性,否則為陰性。
原理:銅綠假單胞菌能產(chǎn)生的綠膿菌素能被氯仿提取,且在水中溶解度比氯仿大,并且會(huì)發(fā)生可逆的氧化還原反應(yīng),氧化時(shí)堿性呈藍(lán)色,酸性呈紅色。所以加入鹽酸溶液并震搖后,綠膿菌素會(huì)由氯仿轉(zhuǎn)移至鹽酸溶液中,并在酸性環(huán)境中呈紅色。
綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長(zhǎng)特征:
綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基(USP)微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時(shí)。