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闊增(上海)生物科技有限公司
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電轉儀celetrix

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所  在  地上海市

更新時間:2024-10-08 12:45:26瀏覽次數:6279次

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產地類別 進口 應用領域 醫療衛生,生物產業
電轉儀celetrix以及相關的電擊管與電轉液綜合優化了儀器電學特性、 電擊管內的電場均勻度以及電轉液的細胞保護作用,是獲得高效、 低 毒性細胞電轉的解決方案。

電轉儀celetrix

細胞電轉染(電轉),也叫細胞電穿孔(electroporation), 是把外源大分子物質DNA、 RNA、 siRNA、 蛋白質以及一些小分子等導入細胞膜內部的重要方法。

在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質以類似電泳的方式進入細胞膜。 由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質內分到的電壓可以忽略不計,細胞質內部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內的電轉過程中細胞毒性很小。 電場使DNA等物質進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質到細胞核等處。

普通電轉能量過高可導致部分細胞因膜破壞而死亡,其中能存活下來的細胞內部都不會受到電流影響,因為細胞膜完整是細胞存活的必要條件。

由千電轉技術依靠的是物理方法,細胞表面的分子特性對電轉影響比較小。 相比化學轉染方法和病毒載體轉染方法,電轉可以用在所有的細 胞種類上,而且容易定量控制。

 

 

以及相關的電擊管與電轉液綜合優化了儀器電學特性、 電擊管內的電場均勻度以及電轉液的細胞保護作用,是獲得高效、 低毒性細胞電轉的解決方案。

 

celetrix電轉儀應用:

•     有效的細胞:幾乎所有的真核細胞,包括所有細胞系,原代細胞,干細胞,血液和免疫類細胞,神經細胞,植物細胞和胚胎。

•     可以電轉的物質包括DNA、 RNA、 siRNA、 蛋白質等。

•     適用實驗:瞬時或穩定表達蛋白質、 基因敲除與敲入、 siRNA和其他分子機制研究。

•     科研領域:細胞分子生物學、 免疫學、 血液學、 神經學、 癌癥研究、 新藥開發等。

 

功能強大   操作簡單

效率高       細胞死亡率低

適用所有真核細胞;可以電轉DNA、RNA、siRNA、蛋白質等;
外觀美觀、界面簡潔、操作簡單。
電脈沖參數設定方便,內部電路反應迅速,設定完成即可啟動,瞬間完成電轉。
示波器功能,顯示實際通過樣品的電流波形,可視化掌控實驗質量。
LED照明燈,清楚指示電擊管連接狀態。
功率強大,單次高效電轉可達1000ul,可以經濟快速的電轉大量細胞。

 

全部過程只需5
1、懸浮細胞(貼壁細胞先消化成單細胞狀態)1000rpm離心3min
2、無血清細胞培養液洗一遍、1000rpm離心1min
3、重懸細胞在電轉液中,加入DNA,將細胞轉移至電擊管蓋好并放入儀器中。
4、設定參數進行電擊,大部分細胞系可以使用30ms單脈沖,只需改變一個電壓參數。
5、取出細胞進行培養。

技術參數

 

儀器型號

 

LE款

 

EX款

 

體積使用范圍

 

20ul~200ul

 

20ul~1000ul

 

常用細胞量

 

20ul

 

0.2×106~2×106

 

0.2×106~2×106

 

120ul

 

1.2×106~1.2×107

 

1.2×106~1.2×107

 

200ul

 

2×106~2×107

 

2×106~2×107

 

600ul

 

 

6×106~6×107

 

1000ul

 

 

1×107~1×108

 

電轉脈沖電壓

 

300V-1500V

 

300V-1500V

 

 

celetrix電轉儀應用的優勢:

Celetrix新一代電轉可以高效轉染從新鮮PBMC到刺激培養階段的T細胞。 與其他電轉技術相比, Celetrix電轉技術具有效率。

我們的技術也具有細胞存活率,并且細胞在電轉后能夠和未電轉細胞

Celetrix電轉儀使得CAR-T, TCR-T制備、 CRISPR介導的基因編輯等變得容易。

 

目前70%以上的治療性抗體蛋白都是由CHO細胞產生

的,Celetrix電轉技術對CHO細胞可以達到高效穩定

(90%以上)的電轉效率和80%以上的存活率, 為治療 性抗體細胞轉染領域提供了更加高效、便捷、 穩定的轉 染方法。

 

利用Celetrix的電轉技術電轉Cas9蛋白和gRNA (+)或者Cas9蛋白,通過T7El核酸內切酶檢測基因編輯效率,在APP, AAVSl, OCT4和PDCDl四個基因位點的編輯效率均超過50%, 其中AAVSl基因位點編輯效率能夠達到70%。

 

•     電極杯中樣品與電極接觸面積大,電化學反應產生毒性物質多,并且產生非常多的氣泡。 氣泡對電轉的實際影響非常大。

•     由千氣泡是絕緣體,電流只能從氣泡之間的間隙溶液流過,這樣導致氣泡間隙的溶液中電流富集升高,處千其中的細胞因承受太高的電壓而死亡。

電極杯內的溶液上方受到液面效應影響,電場不均勻。 靠近兩個電極1-2mm的區域由千氣泡的作用,電場也不均勻。電極杯內電場比較均勻的較優電轉區域很小(右圖藍色部分),而1mm或者

2mm的電極杯甚至可能沒有較優電轉 區域。

液體樣品密封呈規整圓柱形,沒有液面效應影響電場均勻度。

電極與液體接觸面積小,氣泡少又而且被壓縮,不影響電流分配。

電擊管內部電場均勻,全部都是有效電轉 區域。

 

 

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