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類器官 Organoid Dissociation Solution
類器官(Organoids)是指將成體干細胞或多能干細胞在體外三維培養形成的具有一定空間結構的組織類似物。類器官在組織結構、細胞類型、自我更新能力和功能等方面與來源組織高度一致,從而在發育生物學、疾病造模、精準醫學、藥物研發、基因和細胞療法、感染和免疫以及再生醫學等生物醫學的多個領域展現出*的優勢。
產品介紹
bioGenousTM Organoid Dissociation Solution(類器官傳代消化液)可應用于多種哺乳動物(如人、鼠、豬、蝙蝠、牛等)來源類器官的常規傳代,可使類器官從基質膠中分離,并可使其溫和地消化為小細胞簇或單細胞,同時保持其傳代后的生長活力。
技術參數產品信息
產品組成 | 貨號 | 規格 | 儲存條件及周期 |
bioGenousTM Organoid Dissociation Solution | E238001 | 100mL | 2-8°C,12 個月 |
類器官消化過程中可能應用到的其他試劑
試劑 | 推薦貨號 |
Organoid Basal Medium | B213152 & B213151 |
Fetal Bovine Serum, FBS | - |
類器官的消化傳代
1. 向回收后的類器官中加入 5-10倍類器官基質膠混合物體積的Organoid Dissociation Solution(類器官傳代消化液),吹打混勻后在37°C條件下孵育1-8分鐘使類器官解離(需提前取所需體積的消化液在37℃條件下預熱,通常單層結構類器官的消化時間為0.5-3分鐘,多層或者體積較大的類器官消化時間為3-8分鐘)。
注意:在此操作過程中須仔細監測消化過程,避免過度消化。在消化過程中,可使用移液器吹打混勻幫助消化。也可實時取少量消化懸液于顯微鏡下觀察消化情況,當觀察到較多的單細胞或直徑在50μm以下的細胞簇后,即可認為消化完成。
2. 在確認消化完成的懸液中,加入至少五倍體積的類器官基礎培養基進行稀釋,從而終止消化作用。
注意:時間較長的消化過程結束后可適當加入胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)至終濃度2%-5%以保證消化后細胞的活力。
3. 將上步驟所獲類器官懸液進行離心(水平離心轉子,150-300g,3分鐘),棄上清,再次加入基礎培養基重懸類器官沉淀。
4. 將上步驟所獲類器官懸液進行離心(水平離心轉子,150-300g,3分鐘),棄上清后所獲類器官可用于后續類器官培養、凍存等實驗操作。
類器官 Organoid Dissociation Solution