液相色譜對于實驗室分析員來說是容易上手的儀器了，但就算是經驗豐富的分析員都會經常出現錯誤的操作導致液相色譜儀器發生故障。而這個時候分析員一般就會選擇把色譜柱進行反沖這個方法，但恒譜生在這里建議分析員在一般情況下還是不要反沖色譜柱，除非色譜柱有特別說明是可以反沖的。
那么，哪些柱子不能反向沖洗呢？其實有兩種，一種是兩端柱篩板不一樣是不適合的，因為入口的那一端柱篩板的孔徑比較大會導致固體顆粒物質的堵塞，所以一旦進行反沖就有可能出現造成填料的流失從而導致分析柱的柱效下降的情況；另一種就是色譜分析柱柱頭塌陷或變型是不宜反沖是，因為柱頭塌陷或變型了會在柱頭上留下縫隙，從而在反沖的時候會導致柱床移動和填料松動。
雖然液相色譜柱不應該隨便進行反沖，但如果明確知道來自顆粒物堵塞篩板或柱頭污染時，反沖色譜柱是一種補救措施。但反沖前確認柱子是否能夠進行反沖，反沖的時候要注意以下幾點：
1、在把堵塞在入口那一段端的篩板上的污染物沖出來的同時，柱頭的填料可能也會被沖出來造成柱效的降低，甚至色譜柱的報廢。
2、如果色譜柱出入口篩板孔徑不一致的話，反沖色譜柱就有可能造成填料漏出，柱效降低等
3、根據自己用的柱子情況分析到底是什么原因堵塞，可以用易溶于污染物的溶劑來清洗。目前較多的是緩沖鹽鹽析造成，可以用大量的水來沖洗。
4、反沖后要把柱子正過來使用，盡量避免長期反復正反使用。
除了反沖，想要延長色譜柱的使用壽命，可以在分析柱前連接液相保護柱。保護柱安裝在HPLC系統的進樣閥和色譜柱之間，目的用于保護色譜柱和延長色譜柱使用壽命。恒譜生液相制備保護柱為色譜柱提供方便、經濟和有效的保護，延長了液相色譜柱的壽命，保證分析結果的重現性。隨著使用時間的增加，高效液相色譜柱分離效能下降，柱壓增高，其原因主要是由于色譜柱進口段的少量填料被污染引起的，而色譜柱整個柱床并未被破壞，使用色譜柱保護柱，相當于在色譜柱前增加了一段額外的填料，起到了保護整個UPLC色譜柱的作用。
今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！
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