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iPSC-CM搏動跳動評估分析系統(tǒng)

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iPSC-CM搏動跳動評估分析系統(tǒng)
該系統(tǒng)提供了大數(shù)據(jù)集,用于對多個收縮參數(shù)進行穩(wěn)健的統(tǒng)計分析。 通過分析藥物處理的 hiPSC-CM 來驗證了該系統(tǒng):


確認直接激活 (CK-1827452) 或抑制 (MYK-461) 肌球蛋白分子或間接改變收縮性(維拉帕米和普萘洛爾)的化合物的收縮作用。

hiPSC心肌細胞肌節(jié)功能高效大規(guī)模分析系統(tǒng)-為高效大規(guī)模定量分析跳動細胞的動態(tài)影像設(shè)計

iPSC-CM搏動跳動評估分析系統(tǒng)

hiPSC來源心肌細胞高通量收縮性測定系統(tǒng), hiPSC來源心肌細胞搏動頻率肌節(jié)實時跟蹤分析系統(tǒng)(心肌細胞成熟試驗裝置,功能性iPSC誘導的心肌細胞纖維

一個直接、快速、自動地跟蹤搏動心肌細胞中肌節(jié)的分析平臺。 該平臺充分評估肌節(jié)含量、收縮和松弛參數(shù)以及搏動率。

背景及平臺理由:

人類誘導多能干細胞衍生的心肌細胞 (hiPSC-CM) 與 CRISPR/Cas9 基因組編輯相結(jié)合,為研究心臟生物學和疾病提供了難得的機會。 然而,肌細胞收縮的基本單位肌節(jié)在 hiPSC-CM 中是不成熟和非線性的,這在技術(shù)上挑戰(zhàn)了跳動細胞中收縮參數(shù)的準確功能詢問。 此外,現(xiàn)有的分析方法通量相對較低,間接評估收縮性,或僅評估成熟心臟組織中發(fā)現(xiàn)的排列良好的肌節(jié)。

系統(tǒng)平臺優(yōu)勢:

1、高效大規(guī)模定量分析跳動細胞的動態(tài)影像,動態(tài)分析成熟心肌細胞和 hiPSC-CM 的形態(tài)。心肌細胞功能分析的一個關(guān)鍵組成部分是評估跳動細胞的動態(tài)收縮,傳統(tǒng)大多數(shù)設(shè)備方法的都是為靜止圖像(通常是固定細胞)分析;使用動態(tài)數(shù)據(jù)不僅可以測量結(jié)構(gòu),還可以測量結(jié)構(gòu)組件如何在功能上相互作用的各個方面。

該系統(tǒng)的心肌細胞搏動影像的定量分析是將細胞形態(tài)學與動態(tài)細胞功能聯(lián)系起來的一種引人注目的方法。特別是,連接結(jié)構(gòu)和功能是更好地從根本上了解人類誘導多能干細胞衍生心肌細胞

(hiPSC-CM) 的關(guān)鍵一步。與成熟心肌細胞中具有高度有序的規(guī)則結(jié)構(gòu)的肌節(jié)鏈形成鮮明對比的是,hiPSC-CM 中的肌節(jié)鏈通常不成熟且無序 。這種不規(guī)則的結(jié)構(gòu),加上細胞之間的巨大差異

系統(tǒng)平臺用于監(jiān)測 hiPSC-CM中熒光標記的肌節(jié)。 系統(tǒng)算法確定肌節(jié)含量、肌節(jié)長度以及肌節(jié)收縮和松弛的返回率。 通過快速測量每個 hiPSC-CM 中的數(shù)百個肌節(jié),該系統(tǒng)用于分析跳動

hiPSC-CM 的穩(wěn)健定量分析框架將有助于推動藥物發(fā)現(xiàn)、遺傳性心臟病和心臟修復(fù)領(lǐng)域的技術(shù)。

2、內(nèi)置功能來跟蹤圖像幀之間的單個肌節(jié)運動和長度變化

hiPSC-CM 的影像中分割和跟蹤單個肌節(jié)的工具。肌節(jié)配備 Morlet 小波,并假設(shè)收縮遵循周期性鋸齒函數(shù)。由于跟蹤了單個肌節(jié),因此可以在單個肌節(jié)的基礎(chǔ)上報告感興趣的數(shù)量,例如肌節(jié)收縮和松弛時間以及肌節(jié)縮短。

3、該系統(tǒng)提供了大數(shù)據(jù)集,用于對多個收縮參數(shù)進行穩(wěn)健的統(tǒng)計分析。 通過分析藥物處理的 hiPSC-CM 來驗證了該系統(tǒng):

確認直接激活 (CK-1827452) 或抑制 (MYK-461) 肌球蛋白分子或間接改變收縮性(維拉帕米和普萘洛爾)的化合物的收縮作用。 該系統(tǒng)分析在肌球蛋白結(jié)合蛋白 C (MYBPC3) 基因中攜帶雜合截斷變體的 hiPSC-CM,該基因會導致肥厚性心肌病,重現(xiàn)精液疾病表型,包括心臟過度收縮和松弛減弱,以及通過 MYK-461 治療正?;漠惓?。

4、該系統(tǒng)提供了一種直接有效的方法來定量評估肌節(jié)功能。 通過改進現(xiàn)有的收縮力分析方法并克服與 hiPSC-CM 功能評估相關(guān)的技術(shù)挑戰(zhàn),該系統(tǒng)增強了肌節(jié)調(diào)節(jié)療法的轉(zhuǎn)化前景,并加速了人類心臟遺傳變異的研究。

5、高效的分割和跟蹤 2D或3D形態(tài)均可

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