細胞牽引力與單層應力量化分析系統(tǒng)(細胞集落力產(chǎn)生與傳遞分析、細胞單層力產(chǎn)生與傳遞分析、細胞跨邊界力產(chǎn)生與傳遞分析系統(tǒng))
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細胞牽引力連接力收縮力分析系統(tǒng)
該系統(tǒng)可讓您分析在二維表面上生長的細胞、細胞集落和融合細胞層中的力生成和應力。系統(tǒng)集成牽引力顯微量化分析和單層應力顯微量化分析面的功能。除了應力和力生成的標準測量之外,它還包括線張力,一種專門用于跨細胞邊界的力傳遞的測量。用戶只需要簡單設置幾個參數(shù),選擇感興趣的區(qū)域,檢查輸入?yún)?shù)和中間結(jié)果,并計算描述力、應力及其分布的各種參數(shù),就可以對此類實驗進行面評估,可讓您快速分析可視化大型數(shù)據(jù)集。
該系統(tǒng)為研究細胞片層和細胞-細胞粘附連接力的集體遷移行為,為理解生物力學力在細胞-細胞/細胞-ECM 界面上的作用提供了簡潔易用的方法,為理解生物力在單個細胞、細胞集落、細胞-細胞/細胞-ECM界面上的作用提供了新方法,為革新再生醫(yī)學、疾病建模和藥物發(fā)現(xiàn)的突破性技術打開大門,闡明了細胞遷移、增殖、分化、重塑和機械感知其微環(huán)境機制許多方面。
系統(tǒng)框架流程圖:
A:該系統(tǒng)的TFM和單層應力顯微鏡分析的工作流程。B:數(shù)據(jù)組織結(jié)構(gòu)。輸入圖像為橙色,中間結(jié)果為黃色,終輸出為綠色的標量度量形式。定義細胞邊界和計算應變能、收縮率和單層應力的區(qū)域的掩碼為淺藍色。
系統(tǒng)特點:
1、量化分析功能智能強大、操作界面簡潔明了:
該系統(tǒng)集成自動化的樣品直徑測量、顯微校正、自動化測量、分析工具插件,自動化的牽引力分析、形變測量、應力分析、力生成等,只需要簡單填寫基底的機械參數(shù),然后通過鼠標圈點,
即按"start"自動化分析基底上生長的細胞與ECM間、細胞與細胞間、細胞、細胞集落和融合細胞層中的力生成和應力,除了應力和力生成的標準測量之外,還可以進行線張力測量(一
種專門用于跨細胞邊界的力傳遞的測量)。
①:復選框以選擇特定的分析步驟(形變分析、牽引力分析、應力分析、力生成)。
②:輸入選擇需要分析的圖像、自動化漂移校正和細胞邊界的半自動分割。
③:用于在分析數(shù)據(jù)庫中的所有幀或僅分析當前查看的幀之間進行選擇的下拉菜單。
④:PIV 和 TFM 的參數(shù)。
⑤:用于計算牽引力、應力、收縮性、應變能和線張力的用戶選擇區(qū)域(紅色輪廓)和單元邊界(綠色)。
⑥:簡潔易用的工具通過繪制mask來選擇區(qū)域(細胞單層、集落等)和細胞格邊界。
⑦:圖像幀導航條。簡潔明了使用 Page Up 和 Page Down 鍵導航圖層,使用左右箭頭鍵導航框架。
⑧:界面化面板調(diào)整圖像顯示的對比度和亮度。便于手動分割細胞、集落、單層等的邊界。
2、量化分析面精準:形變場、牽引場、收縮性、應變能和細胞應力以及沿細胞邊界的線張力和法向應力
A:細胞通過yi蛋白酶消化分離前后的底物包埋熒光珠圖像。B:基底變形場。C:牽引力場。用戶選擇隨后計算收縮性、應變能和細胞應力的區(qū)域(紅色輪廓)。D:細胞集落圖像;用 tdTomato-Farnesyl 進行熒光膜染色。E:細胞集落中平均法向應力的對值。F:沿細胞邊界的線張力。橙色虛線標記細胞集落的外邊緣。
該系統(tǒng)可以輸出所有場(變形、牽引力、應力),并繪制為矢量場或熱圖。還可以繪制細胞間力傳導和應變能密度(參見上圖)。用戶可以完控制生成哪些圖。所有計算出的標量結(jié)果都保存在一個制表符分隔的文本文件中。可以使用標準文本編輯器或 Excel 等數(shù)據(jù)分析工具打開結(jié)果文本文件等。
3、該系統(tǒng)專門使用傅里葉變換牽引細胞術算法 。該算法簡單、穩(wěn)健且完善,
該系統(tǒng)細胞力產(chǎn)生和應力的典型測量:
基材變形
應變能
收縮力
平均法向應力和剪切應力
應力分布
跨細胞邊界作用的力等
細胞牽引力連接力收縮力分析系統(tǒng)