產品說明:
匯智泰康公司的沙門氏菌LAMP檢測試劑盒,采用環介導等溫擴增結合鈣黃綠素顯色技術,適用于食品及環境中沙門氏菌的快速檢測。
本產品具有以下特點:
- 簡單快速,只需在反應管中加入待測DNA模版,60-65℃恒溫反應60min即可肉眼觀察結果,不需要特殊儀器。
- 可用于檢測食品樣本前增菌液或細菌純培養物(如:菌落)。
- 不含有任何有毒的試劑。
產品組成(24次/包裝)
組成(24個反應) | 數量(管) | 規格 |
DNA提取液A | 2 | 1.5mL/管 |
DNA提取液B | 1 | 0.6 mL/管 |
LAMP反應管 | 24 | 23 μL反應液+30 μL保護液/管 |
陽性對照 | 1 | 50 μL/管 |
運輸及保存條件
干冰運輸。-20oC條件下保存6個月。避免反復凍融。
使用說明
- 模板制備
食品樣本前增菌液:吸取標準方法培養的食品樣本前增菌液200 μL加入1.5 mL離心管中,10 000 r/min離心2 min,棄上清。加入100
- B,混勻后離心,上清液即為DNA模板。制備的DNA樣品-20oC可長期保存。
- 純細菌培養物:對于標準方法分離到的疑似菌落,可直接挑取疑似菌落,按a中步驟,加入DNA提取液A和B制備DNA模板
- LAMP檢測
- 取出n個LAMP反應管(n=待測樣本數+陽性對照+陰性對照)于冰上融化并短暫離心;
- 向上述反應管加入陰性對照、待測樣品或陽性對照DNA樣本各2 μL。
注意:加樣時槍頭要穿過保護層加至反應液層,蓋緊管蓋并做好標記。由于LAMP反應非常靈敏,建議使用帶濾芯的槍頭,并在生物安全柜中操作,避免可能出現的污染。
- 64oC恒溫反應60 min。
- 80oC加熱10 min終止反應。
結果判斷
- 肉眼或紫外燈下觀察:陰性對照管,橙色澄清;陽性對照,綠色渾濁。
- 若待測樣品管中液體呈橙色澄清,則可初步判斷待測樣品中不含沙門氏菌;若待測樣品管中液體呈綠色渾濁,則可初步判斷待測樣品中含沙門氏菌;
圖注 1:陰性對照
2:陽性對照
注意事項
- 實驗開始前對工作臺進行紫外照射,并使用1%次氯酸鈉或75%酒精清理工作臺面。需定期按上述要求對各實驗區域進行清理。
- 實驗室嚴格分區,各區物品,嚴禁交叉使用。
a. 待測樣品模板制備區
b. 反應體系配制區
c. 反應區及結果觀察區(建議在通風櫥中進行)
- 結果觀察時應該小心謹慎,避免劇烈震蕩,反應物外溢。
- 結果分析完成后反應管應密封于容器內,丟棄于地點;實驗過程中的廢棄物及一次性耗材均需*滅菌后方能丟棄。