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流動相需要注意的事項
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施啟樂（廣州）儀器有限公司
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流動相是影響液相色譜的關(guān)鍵因素。一個理想的液相色譜流動相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。高效液相色譜法中的流動相主要用水性溶劑、有機溶劑或它們的混合液。但是如何配制，選擇配制的方法不同，分析結(jié)果特別是保留時間，是會有顯著差別的。高效液相色譜法中的流動相主要用水性溶劑、有機溶劑或它們的混合液，水性溶劑也常用于緩沖液。常因資料上表示的內(nèi)容和實際的配制方法不同，而產(chǎn)生流動相的差異，影響了色譜圖和分析結(jié)果。一般來說，溶劑的混合按體積比（V/V）或重量比（W/W）進行。溶液的體積因溫度而變化，所以按重量比混合可調(diào)制再現(xiàn)性較好的混合溶劑，但由于操作較麻煩，通常多用體積比混合。只要沒有特別標明，就可按體積比進行混合，但在特殊情況下，如胺類粘度高的溶液混合時，有時用重量—體積比（W/V）的方法。
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點：
a、流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。流動相溶解度達不到要求時，盡量選用流動相中含有的比例較大的成分，以減輕進樣對流動相的影響造成基線不穩(wěn)。
b、流動相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)，選用流動相配置對色譜峰影響最小。
c、流動相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。
d、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器，最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制。流動相組成溶劑均達不到要求時，選取的溶劑應(yīng)保證在設(shè)定波長內(nèi)無紫外吸收。
e、流動相沸點不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實驗無法進行。
f、在流動相配制好后，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。