目錄:上海牧榮生物科技有限公司>>化學(xué)試劑>>其他化學(xué)試劑>> PG2-ALBN-2kBiotin PEG aldehyde, Aldehyde PEG 生物素
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生物素聚乙二醇醛(Biotin-PEG-CHO) 是 Nanocs 的化學(xué)反應(yīng)性生物素 PEG 衍生物之一,可以標(biāo)記 N-末端胺。醛基在 pH 5-9 時對胺基、酰肼基或羥胺基具有反應(yīng)性。與胺反應(yīng)性琥珀酰亞胺酯基團(tuán) (NHS) 不同,醛可以在酸性環(huán)境 (pH ~ 4) 下與質(zhì)子化胺反應(yīng),這是某些位點(diǎn)特異性生物素化反應(yīng)有時需要的條件。醛與胺基反應(yīng)形成中間席夫鍵。用氫化物進(jìn)一步還原將形成穩(wěn)定的 CN 鍵。醛和其他基團(tuán)之間的反應(yīng)允許位點(diǎn)特異性結(jié)合和標(biāo)記生物素標(biāo)簽到目標(biāo)分子上的所需位置。所得生物素可以高親和力識別并結(jié)合親和素、鏈霉親和素或中性親和素。生物素和醛之間的 PEG 接頭提供更高的水溶性,空間位阻較小,穩(wěn)定性增強(qiáng)。與其他常用的生物素化試劑相比,Nanocs聚乙二醇化生物素是水溶性的,更穩(wěn)定,更易于使用。
物理性質(zhì):
外觀:白色/灰白色固體;
溶解性:易溶于水、DMSO、DMF;
反應(yīng)基團(tuán):醛(-CHO);
與:N-末端胺、伯胺等反應(yīng);
功能部分:D-生物素;
對:親和素、鏈霉親和素或中性親和素具有反應(yīng)性;
反應(yīng)程序:
通常,生物素 PEG 醛相對于含胺分子(例如蛋白質(zhì)或抗體)的量 超過 5 到 10 倍摩爾過量會導(dǎo)致充分結(jié)合。
所需材料:
反應(yīng)緩沖液:無胺水性緩沖液,pH 5.0~6.5。
生物素 PEG 醛原液:5-10 mg 溶于 1 mL 結(jié)合緩沖液。
洗滌液:蒸餾水或任何水性緩沖液。
反應(yīng)步驟:
將現(xiàn)成的標(biāo)記分子溶解在聚乙二醇化緩沖液中。估計(jì)目標(biāo)材料上伯胺基團(tuán)的濃度。將生物素 PEG 醛庫存溶液添加到目標(biāo)共軛材料中,最終濃度保持至少 10 mg/mL。讓混合物在室溫下攪拌 2~4 小時或在 4 0 C 下攪拌過夜。反應(yīng)后,C=N 鍵可被還原。綴合物可以通過尺寸排阻層析或透析進(jìn)行純化。
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