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StainODye Nitrocellulose Membrane Protein Stain，產品型號：FGI-1933。

StainODye Nitrocellulose Membrane Protein Stain，

概述

提供為：含 0.05% 防腐劑的磷酸鹽緩沖鹽水中的 2 mg/ml 蛋白 A 純化兔 IgG。

是高度純化的人 PARP1 蛋白，在桿狀病毒表達系統中表達。PARP1 具有很高的比活性，大約。20000 U/mg（1U=10 fmol ADP-核糖在 30 分鐘@RT 內并入固定化組蛋白）。它在特殊條件下從其天然狀態凍干，用水重構后，它保留了其天然聚 ADP-核糖基化酶活性。SDS-PAGE 的純度 > 95%。每個小瓶包含 50 µg PARP1（約 1000 單位）。

●用于高通量酶活性/抑制測定

●目標蛋白的聚-ADP-核糖基化

●Western Blot，100 ng/lane，使用 HRP/TMB 比色法

●ELISA，2 ng/孔

●SDS-PAGE, 1 µg/泳道

●作為其他檢測的標準

供應形式：凍干固體，50µg/管

優點

• 快速確定蛋白質在純硝酸纖維素/支持的硝酸纖維素和帶電膜上的轉移效率

• 避免因轉印不均勻、不轉印和氣泡而重新做western blots

• 染色膜可以拍照，用于西方印跡協議中的質量控制步驟。

• 與硝酸纖維素膜和 PVDF 膜兼容

• 防腐劑允許在室溫下保質期為 1年

協議

1.將 10 x 12 cm 膜的大約 10-15 mL 染料倒入干凈的玻璃容器中。 

1. 2.通過在搖擺平臺上緩慢搖動 1-2 分鐘來孵育膜。

2. 3.去除并丟棄多余的染料，用蒸餾水或 PBS 清洗膜，直到背景清晰。 

1. 可能需要多次洗滌以獲得最佳信噪比。

3. 4.膜可以立即拍照，干燥的膜可以用水潤濕來拍照。

4. 5.長期存放時條帶可能會輕微褪色。立即記錄顏色強度可獲得最佳效果

StainODye TM是一種可逆且靈敏的工具，用于檢測蛋白質在硝酸纖維素膜上的轉移效率。憑借快速的響應時間、每條帶 25-50 ng 的檢測下限和快速簡便的方案，StainODye TM是傳統麗春紅 S 染色的更好替代品。與結合蛋白質的其他染色劑如Amido black / Coomassie不同，StainODye TM對蛋白質具有高親和力，但在 PBS 或封閉溶液中會被洗掉。  此外，StainODye TM以高親和力標記糖基化蛋白 總蛋白質的結果可視化。

定量 Western 印跡應用需要將蛋白質均勻轉移到膜上，以便對結果進行比較分析。有一些準確的方法可以在電泳前將固定數量的蛋白質加載到凝膠上，但是，很少有方法可以量化蛋白質在硝酸纖維素/帶電膜上的轉移效率。不均勻轉移、非轉移和氣泡是可能影響定量蛋白質印跡結果的一些問題。StainODye TM   _ 允許在蛋白質轉移到帶電膜后立即在硝酸纖維素或其他類型的轉移介質上直接觀察蛋白質。在StainODye TM中顯影后，蛋白質條帶呈紅色或粉紅色。這些染色的膜可以拍照作為記錄。StainODye TM是可逆的，可以通過用水或 PBS 沖洗印跡來洗掉。或者，它們可以直接孵育在封閉緩沖液 (BlockOB uffer TM ) 中用于蛋白質印跡。StainODye TM帶有防腐劑，在室溫下保質期約為 1 年   。

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