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方法IP 346

工作原理：將稱重后的油（通常為4克）溶于環己烷中，然后用二甲基亞砜連續提取兩次所得溶液。將鹽水溶液加入合并的二甲基亞砜提取物中以沉淀提取的化合物，然后將其反萃取到環己烷中。對所得溶液進行處理以去除水分，然后轉移到皮重燒瓶中，通過旋轉蒸發去除環己烷。稱量燒瓶，并通過從最終重量中減去皮重來確定殘留物的重量。所得值以二甲基亞砜可提取物的重量百分比表示。

終點：IP 346測定的終點是從測試材料中提取到DMSO中的材料的重量百分比。

結果解釋：歐盟委員會已規定將方法IP 346用作標記某些煉油廠物流致癌可能性的基礎。這些包括餾出物范圍*內的所有物流，但通常不包括源自真空渣油的物流。該標準要求PAC含量大于或等于3%（w/w）的油被標記為潛在致癌物*在使用規定的蒸餾程序進行分析之前，預計沸點低于300oC的輕物流必須“加滿"，而PetroLabs目前沒有提供這項服務。

物流：見改良Ames測試

工作成果：我們嚴格按照石油學會出版物中描述的程序執行方法IP 346。

改良艾姆斯試驗

工作原理：在開發該檢測方法時，對標準Ames致突變性檢測方法進行了修改，以對主要導致石油致突變性和致癌性的一類化合物多環芳香化合物（PAC）提供最大的靈敏度。使用改良的致突變性試驗對已經在小鼠皮膚彩繪生物測定中評估的一系列油進行了測試，并通過劑量反應的回歸分析對其致突變性反應進行了量化。然后，將這些分析產生的斜率（稱為致突變指數或MI）與根據皮膚彩繪生物測定中的腫瘤反應計算的類似致癌性指數（CI）相關聯。由此得出的標準曲線用于建立MI閾值，超過該閾值，油將有望在皮膚彩繪試驗中顯示出統計上顯著的致癌活性。由于MI和CI之間的相關性成立，因為油的致突變性和致癌性在很大程度上（如果不是一的話）是由PAC介導的，因此改良Ames試驗的適用性僅限于含有這些化合物的試驗材料。這一類別包括煉油廠物流，以及用過的或再精煉的油、煤衍生的焦油和油，以及這些材料中包含的配方產品，前提是配方中不存在干擾測試性能或解釋的成分。

終點：改良艾姆斯試驗的終點是致突變性指數或MI。它是使用線性回歸分析確定的致突變性劑量反應曲線的斜率。MI的范圍從高度精煉油的0到某些催化裂化原料的大于1200。

MI的解釋：在小鼠皮膚彩繪生物測定中，MI與皮膚致癌潛力的相關性表明，大多數MI大于1.0的油是致癌的，而大多數MI小于1.0的油不是。后一種規范的例外是被稱為亮庫存提取物或殘余芳香族提取物的油類，這些油要在歐盟被證明是非致癌的，其MI必須小于0.40。

物流：我們建議提交用于改良Ames測試的樣品不大于25毫升。確定MI的最小樣品量為0.2毫升，但如果將已知體積的油預先測量到適合使用相對于樣品量五倍體積的二甲基亞砜提取的容器中，則可以獲得小至0.05毫升的樣品的有限數據。化驗周轉時間取決于工作量，但當贊助商匆忙要求結果時，我們通常可以提供每周七天的檢測和報告服務，不收取額外費用。測試完成后，通過電子郵件將結果以MI的形式提供給贊助商。詳細的書面報告（也可以通過電子郵件發送）通常在一兩個月內完成，但也可以根據需要快速提供。可應要求提供報告的紙質副本。我們歡迎有關定制報告格式或數據分析的咨詢，并很樂意提供有關Modified Ames Test或我們的其他測試的使用和解釋的教程，作為我們咨詢服務的一部分。

工作成果：PetroLabs嚴格按照ASTM方法E 1687 10進行改良Ames試驗。根據該方案，我們在每次測定中測試了參考油的全劑量范圍（陽性對照），以確保所用S-9制劑的代謝性能在可接受的歷史范圍內。我們為只向贊助商提供明確的MI數據而感到自豪。如果給定試驗的任何控制參數超出范圍，或者致突變性的劑量-反應曲線不能很好地擬合（例如，活性材料的R^2<0.90），我們重復試驗，不收取額外費用。我們按照嚴格的科學標準和實驗室實踐進行改良艾姆斯試驗，但我們沒有遵守良好實驗室實踐（GLP）指南的所有文件和質量保證規定。因此，目前，我們的研究僅用于贊助商信息，如果相關機構要求全遵守GLP，則不適用于監管提交。

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