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雙鏈特異性核酸酶
目錄號EA001; EA002; EA003; EA008
-選擇性切割DNA-RNA雜交雙鏈體中的ds DNA和DNA-
區分*匹配和
非匹配的短雙鏈體-對ss DNA和RNA無活性
-熱穩定
-被EDTA抑制
雙鏈特異性核酸酶（DSN）是一種從紅金（Kamchatka）蟹的肝胰腺中純化的酶（Shagin 等，2002）。DSN對在DNA-RNA雜交雙鏈體中裂解雙鏈（ds）DNA和DNA表現出強烈的偏愛，并且實際上對單鏈（ss）DNA或單鏈或雙鏈RNA無活性。此外，該酶能夠區分*匹配和不*匹配的短DNA雙鏈體。DSN被廣泛用于全長富集的cDNA標準化（Zhulidov 等，2004; Bogdanova 等，2011a）和用于下一代測序的標準化RNA-seq文庫的構建（（Christodoulou 等。（2011年），Illumina DSN標準化協議）。已批準的DSN應用列表還包括基因組DNA的標準化（Shagina 等，2010），cDNA耗竭和核糖體cDNA耗竭（Bogdanova 等，2009； Bogdanova 等，2011b； Yi 等，2011），減去cDNA（Peng 等，2008），SNP檢測（Shagin 等，2002; Liu 等，2011），構建無重復的FISH探針（Swennenhuis 等，2012），多重熒光檢測miRNA （Yin 等人，2012），定量端粒突出端測定（Zhao 等人，2008； Zhao 等人，2008）。（2011年）等。
產品 貓。＃ 描述 尺寸 價錢 使用手冊（PDF）
雙鏈特異性核酸酶，凍干 來自Red King（Kamchatka）蟹肝胰腺的熱穩定核酸酶，強烈希望裂解雙鏈DNA和DNA-RNA雜交雙鏈體中的DNA 10U DSN用戶手冊
EA003 10U evrogen
EA001 50U evrogen
EA002 100 U evrogen
EA008 1000U evrogen
使用Shagin 等人的改良方案從Red King（Kamchatka）蟹肝胰腺中純化DSN 。，2002。使用改良的Kunitz測定法（Kunitz，1950）測量DNAase活性，其中單位定義定義為：添加到50μg/ ml小牛胸腺DNA中的DSN量，導致每分鐘0.001吸收單位增加。活性測定是在25°C，含有5mM MgCl 2的 50 mM Tris-HCl緩沖液（pH 7.15）中進行的。
運輸和儲存條件：
套件的所有組件均可在環境溫度下運輸。到達后，所有組件都必須在-20°C下存儲。
研究產品：
-光誘導的高對比度光轉換
-可通過流式細胞儀或熒光顯微鏡輕松檢測
-無需輔因子，底物或化學染色
-適用于長期追蹤細胞事件
可光活化的熒光蛋白（PAFP）代表了監視細胞事件的*工具。PAFP響應于特定光的照射而改變光譜特性。近年來，PAFP已用于時空方式光學標記和跟蹤活細胞，細胞器和細胞內分子的新方法的開發。PAFP成為超分辨率成像技術*的工具。此外，PAFPs為研究細胞生理學開辟了新的可能性，特別是，它們允許仔細確定蛋白質的半衰期。
應用領域
跟蹤細胞，細胞器和蛋白質的
運動PAFPs比光漂白技術（例如光漂白后的熒光恢復（FRAP）或光漂白中的熒光損失（FLIP））使細胞和蛋白質的研究運動更，直接，且破壞更少。PAFP標記的單個細胞，細胞器或蛋白質部分可以使用聚焦光束進行光轉換。然后，可以直接看到活體組織內的激活對象[Patterson and Lippincott-Schwartz，2002; Chudakov 等。，2004；Chapman 等。，2005；Gurskaya 等。，2006；Chudakov 等。，2007]。近年來，PAFP成為超分辨率成像技術*的工具[Subach 等。，2010]。
蛋白質降解研究
PAFP允許仔細確定蛋白質半衰期[Zhang 等。，2007]。用編碼與PAFP融合的靶蛋白的構建體轉染細胞。融合蛋白和相應熒光信號的穩態濃度取決于蛋白合成和成熟速率以及蛋白降解速率。PAFP在整個細胞中進行光轉化后，會出現一組*的熒光分子，這與新的PAFP分子的合成和成熟無關。因此，活化熒光的衰減直接對應于PAFP標記的蛋白質的降解。激活信號的延時成像可以實時量化單個細胞水平的降解過程。
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