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小白蛋白貓#MCA-3C9的小鼠單克隆抗體
小白蛋白是一種低分子量胞質鈣結合蛋白,含有“ EF手鈣結合基序,是該亞類(1)中表征的第yi個蛋白質。小白蛋白在快速收縮的肌肉,大腦和某些內分泌組織中表達。在腦中,它尤其集中在分子層的Purkinje細胞和中間神經元中,但在許多皮質GABA能中間神經元中也發現(1-3)。這些GABA能神經元在大多數情況下僅表達三種鈣結合蛋白之一,即小白蛋白,鈣網蛋白或鈣結合蛋白。結果,這些中間神經元可以根據它們在這三種蛋白質中的含量(4-6)進行識別和分類。每種類型的中間神經元都具有不同的電生理特性,因此,可以根據它們在這三種蛋白質中的含量來鑒定和分類不同類型的中間神經元(7)。因此,針對小白蛋白的抗體是有用的細胞類型標記物,與這種抗體一樣,它們不會與相關分子鈣網蛋白或鈣結合蛋白發生交叉反應。EnCor還生產雞小白蛋白的多克隆抗體CPCA-Pvalb。我們還提供多種針對calbindin(MCA-9和CPCA-Calb)和calretinin(MCA-3G9,MCA-6A9和CPCA-Calret)的小鼠和雞抗體,可以對適當的細胞和組織樣品進行兩次和三次標記。鼠標左移選擇圖像以獲得更大的視野。
大鼠小腦切片的免疫熒光分析,用小鼠mAb染色小白蛋白,MCA-3C9,稀釋度為1:1,000,綠色,并與雞pAb染色鈣結合蛋白,CPCA-Calb,稀釋度為1:2,000,紅色。藍色是核DNA的DAPI染色。用4%多聚甲醛對大鼠進行心臟心臟灌注后,將大腦固定24小時,切成45μM,并用上述抗體將自由漂浮的切片染色。大多數浦肯野細胞強烈表達小白蛋白和鈣結合蛋白,因此呈黃色,而籃,星狀和高爾基細胞僅表達小白蛋白,因此呈綠色。
使用小鼠mAb對小白蛋白,MCA-3C9,以1:1,000的綠色稀釋度對骨骼肌溶解產物和His標記的重組蛋白進行Western印跡分析:[1]蛋白標準品(紅色),[2]小鼠肌肉,[3]全長人小白蛋白,[4]全長人降鈣素和[5]全長人降鈣素。正如預期的那樣,在肌肉裂解液中檢測到一條12kDa的條帶,在His標記的重組小白蛋白蛋白泳道中檢測到一條18kDa的條帶,因為His-tag和其他載體衍生的序列使該分子增加了約6kDa。請注意,盡管MCA-3C9抗體具有相關的氨基酸序列,但它們與calbindin或calretinin均不交叉反應。
名稱: 小鼠單克隆抗體小白蛋白
免疫原 在大腸桿菌中表達并純化的全長重組人蛋白質。
HGNC名稱: PVALB
分子量: 12kDa的
主辦: 鼠
同型: IgG1
物種交叉反應: 人,大鼠,小鼠,牛,豬,馬
RRID: AB_2572372
格式: 在50%PBS,50%甘油和5mM NaN 3中的 1mg / mL純化抗體
應用范圍: WB,IF / ICC,IHC
推薦的稀釋液: WB:1:1,000-1:5,000 ICC / IF或IHC:1:1,000-1:5,000
存儲: 在4°C穩定一年,可在-20°C長期保存
小鼠單克隆抗體髓鞘堿性蛋白
Cat#MCA-7G7
髓磷脂堿性蛋白(MBP)是神經系統中軸突周圍髓鞘的主要蛋白之一。由于分子量相對較低且豐度較高,因此30年前從純化的蛋白質中確定了蛋白質序列(1)。該蛋白質由中樞和神經系統中的少突膠質細胞產生,因此針對MBP的抗體是該細胞類型的良好標記。在外周神經系統中,MBP是由有髓的雪旺氏細胞表達的,因此該抗體可用于識別培養物或切片材料中的這些細胞。在中樞神經系統中,通過從單個基因交替轉錄產生的四種不同形式的蛋白質,蛋白質產物在人體內的分子量分別為21.5、20.5、18.5和17.2kDa。嚙齒動物的單個基因也產生4種不同的蛋白質,但是剪接機理不同,產生4種形式,大小略有不同,分別為21.5、18.5、17和14kDa。一些興趣集中在MBP作為多發性硬化癥小鼠模型(MS,3)和人類患者(4)中潛在的重要自身抗原上。檢測釋放到血液和腦脊液中的MBP有可能作為MS脫髓鞘和軸突丟失以及其他相關損害和疾病狀態的替代生物標志物(例如5)。
MCA-7G7抗體是針對從牛腦中進行生物化學純化的MBP制劑制備的。它可用于鑒定神經細胞培養物中的少突膠質細胞和雪旺氏細胞,可視化切片材料中的髓鞘和髓鞘細胞,并檢測MBP基因產物的蛋白質印跡。該抗體對醛固定也相當不敏感,因此可用于石蠟切片的免疫組織化學。MCA-7G7抗體結合所有四個CNS MBP亞型,因此該抗體的表位位于所有四個基因產物共有的“核心”中。進一步作圖將表位定位于肽TPPPSQGKG,即人21.5kDa序列的氨基酸125-133。用重疊的肽產生了數據,這表明后四個氨基酸SQGKG可能是表位的關鍵元素。該肽在大鼠,小鼠,牛和許多其他物種中是不變的,因此該抗體將具有廣泛的適用性。相反,我們的替代小鼠單克隆MCA-7D2僅與21.5kDa和18.5kDa大鼠MBP同種型結合,但與所有牛和人同種型結合,將表位映射AEGQRPGFGYGGRASDYKSAHKGFKGVDAQGTLSKIFKLG,即人21.5kDa序列的氨基酸145-184。可以從此處下載人和大鼠中四種CNS MBP同種型的序列比對。鼠標左移選擇圖像以查看大圖,而“其他信息”選項卡上則選擇更多信息。
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