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ABTS自由基清除能力測試試劑盒上海惠誠現(xiàn)貨

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號A005-96T酶標板法

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2023-02-15 16:18:44瀏覽次數(shù):813次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1kit
貨號 A005-96T 酶標板法 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè)
ABTS自由基清除能力測試試劑盒上海惠誠現(xiàn)貨A005-96T 酶標板法
采用ABTS評價樣品抗氧化能力初由Miller等(1993)提出,現(xiàn)采用的一般是后來Re等(1999)改進后的方法。該方法利用ABTS可被過硫酸鉀、過氧化氫、二氧化錳等一系列化合物氧化,生成藍綠色的ABTS+陽離子自由基,在734nm處有大吸收峰。

ABTS自由基清除能力測試試劑盒上海惠誠現(xiàn)貨

A005-96T 酶標板法)

一、 測定原理

采用ABTS2,2-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt)評價樣品抗氧化能力初由Miller等(1993)提出,現(xiàn)采用的一般是后來Re等(1999)改進后的方法。該方法利用ABTS可被過硫酸鉀、過氧化氫、二氧化錳等一系列化合物氧化,生成藍綠色的ABTS+陽離子自由基,在734nm處有大吸收峰。在抗氧化劑的作用下, ABTS+還原成無色的ABTS。通過測定734nm處的吸光值,即可判定反應物的抗氧化能力。

二、 試劑組成

試劑一:ABTS試劑300μL × 1

試劑二:液體試劑300μL × 1

試劑三:1mM Trolox標準溶液 1ml×1支(乙醇配制)

三、 儲存條件及有效期

試劑盒-20℃可保存6個月。

四、 試劑的配制

ABTS應用液:將試劑二小心全部轉(zhuǎn)入試劑一管內(nèi),旋好管蓋,搖勻,室溫放置12-16h,得到ABTS濃縮液。取10μLABTS濃縮液,采用稀釋液(稀釋液先采用純水20×稀釋)稀釋至734nm處吸光度為0.65-0.75,記下稀釋倍數(shù)(通常稀釋倍數(shù)為50-200倍,可先從80-100倍區(qū)間內(nèi)開始嘗試。)將剩余濃縮液按稀釋倍數(shù)稀釋,得到ABTS應用液,避光存放。

Trolox標準溶液:如您需要將樣品的ABTS自由基清除能力表示為Trolox當量(TEAC),則需要同步測定TroloxABTS清除能力;如您僅需要將結(jié)果表示為ABTS自由基清除率,則您可以忽略此步驟(可以不需要用到試劑三)。

五、 操作步驟

 

空白孔

測定孔

對照孔1

ABTS應用液(μL

200

200

 

樣品溶液(μL

 

20

20

稀釋液(μL2

20

 

200

充分混勻,室溫避光靜置30min3使之充分反應。734nm處采用酶標儀測定吸光值。

1如樣品顏色較淺可不做對照管(即認為對照為0);

2稀釋液即您配制樣品的溶劑,一般為水、乙醇、PBS等;

2建議反應30min,數(shù)值更為準確,但一般快速測定時,反應10min即可(參考文獻:)。

ABTS自由基清除能力測試試劑盒上海惠誠現(xiàn)貨

六、計算公式

1. 簡單計算清除率

 

2. 將清除率表示為Trolox當量(Trolox Equivalent Antioxidant Capacity, TEAC

先根據(jù)計算方法1求出不同濃度TroloxABTS自由基清除能力,并作出標準曲線(如下圖),再根據(jù)計算方法1求出樣品的ABTS自由基清除能力,根據(jù)標準曲線求出TEAC

 

注:1 如未做對照孔,可以將其視作為0

       2 質(zhì)控孔求值時將其視作測定孔進行計算即可。

七、注意事項

1. 如樣品中色素物質(zhì)不是分析對象,建議先進行脫色處理,處理后樣品可不做對照孔;

2. 如不確定樣品的ABTS自由基清除能力,可先做不同濃度的稀釋液進行摸索,并選擇適宜濃度進行測定,高濃度下,濃度與清除率間并不線性相關。Trolox標準曲線繪制建議選取100-1000μM的濃度進行分析;

3. 混勻很重要,建議加樣時反復吹打,加樣結(jié)束后劇烈振搖酶標板30秒以上(液體不能濺出來)。

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