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供貨周期 | 現貨 | 貨號 | ProG |
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應用領域 | 醫療衛生,環保,食品,化工,生物產業 |
國標用抗體純化柱ProG上海惠誠供應
1. 產品簡介
抗體純化柱ProG以瓊脂糖凝膠為基質,以重組Protein G為配基,具有良好的物理化學穩定性,配基不易脫落,壽命長,使用方便。該產品通過偶聯的Protein G配基特異性地與抗體的Fc區結合,經過一步親和層析,即可從腹水、血清和細胞破碎液等樣品中得到高純度的單克隆抗體,尤其是羊IgG、馬IgG、鼠IgG2a或人源IgG3等ProA介質結合能力弱的抗體。
2. 產品特性
參數 | 指標 |
柱體積 | 1ml |
基質 | 瓊脂糖凝膠 |
配基 | r-Protein G |
形狀 | 球形 |
介質平均粒徑 | 90 μm (45-165) |
配基密度 | 5mg Protein G/ml wet gel |
動態載量 | 30mg-40mg h-IgG |
zui高流速(25℃) | 3ml/min |
zui高耐壓 | 0.3 MPa (3 bar) |
pH穩定性 | 3~12(長時間);2~13(短時間) |
保存 | 4~8 oC(20%乙醇) |
3. 應用
抗體純化柱ProG廣泛用于各種抗體的分離純化。層析操作通常包括平衡、進料、淋洗、洗脫、再生等步驟。
層析系統連接柱子時,嚴防氣泡進入,導致載量下降。
平衡:用5~10CV的平衡緩沖液(20 mM PB+0.15M NaCl,pH 7.0,添加適當濃度的NaCl抑制非特異性吸附)平衡層析柱,至流出液電導和pH不變(與平衡液一致)。
進料:樣品緩沖液應盡可能與平衡液一致。固體樣品可用平衡液溶解配制;低濃度樣品溶液可用平衡液透析;高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。為了避免堵塞層析柱,樣品應經離心或微濾(0.45μm)處理。進料量根據介質的載量和料液中目標蛋白的含量計算。
淋洗:上樣完畢后繼續用平衡緩沖液淋洗至基線。
洗脫:用洗脫緩沖液(20 mM乙酸鈉,pH 3.0-4.0或0.1M甘(空)氨酸,pH 3.0)洗脫,收集流出液。洗脫后,應立刻用堿性緩沖液(如1M Tris/HCl, pH 9.0)將收集到的抗體溶液中和到中性,避免抗體失活,維持抗體的生物活性。
再生、原位清洗:介質使用數次(建議5-10次,具體次數與料液的種類和來源及實驗要求有關)后,需要對介質進行再生、在位清洗。
(1)用0.1M的乙酸或0.1M的乙酸/20%乙醇淋洗柱子3-5CV,然后用緩沖液洗到中性即可重復使用;
(2)也可用0.05M NaOH+1M NaCl或6M鹽酸胍淋洗柱子3-5CV,并用3~10 CV的純水沖洗,然后用緩沖液洗到中性即可重復使用。
國標用抗體純化柱ProG上海惠誠供應
其它注意事項:在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。
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