產品名稱
AAV-293 腺病毒轉化的人胚腎細胞(通過STR)
(Cat.No:XK-Y1006)
適用范圍
本產品*于科學研究,絕不可
作為人類或者動物疾病的治療產品使
用。
*培養基配置
DMEM(高糖)+ 10% FBS + 1% P/S
細胞圖片
產品描述
種屬:
人源(Homo sapiens)
組織:
胚胎腎(Embryonic kidney )
細胞形態: 上皮細胞樣(Epithelial )
生長特性: 貼壁生長(Adherent)
培養環境:
37℃ , 5% CO2 ,95% AIR
拆包
1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液,如有,請拍照并及時與技
術聯系。
2.請立即將細胞從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進行處理。
T25 培養瓶中的細胞操作步驟
1. 75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養瓶外部。
2. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照保存(40
×,100×,200×各一張)前三天照片為重要售后依據,不提供或未
拍照默認收到狀態良好。
3. 不要打開培養瓶蓋,將細胞放入 37 度培養箱中靜置 3-4 小時后
再做處理,以穩定細胞狀態
4. 貼壁細胞:若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養基。每瓶添加
配制好的*培養基 5-6ml。放到 37 度培養箱培養。待細胞密度到
80%以上,進行傳代。
懸浮細胞:將瓶內所有培養基離心收集,重懸計數根據密度進行
分瓶,密度在 3x10^5/ml 為宜。
注意:*次傳代比例建議 1:2,之后可根據細胞密度和增
殖情況適當調整。
凍存管細胞的操作步驟
1. 收到細胞后,檢查外包裝情況和箱內是否還有干冰。如有外包裝
破損干冰已*揮發等問題,請即時聯系。
2. 將細胞取出轉移至-80 度冰箱(不超過一周)或液氮保存,建議盡早
復蘇。
3. 復蘇*管后有活性狀態問題及時與我們聯系,會有技術人員與
您溝通指導后再復蘇第二管。
注意:為保證細胞的高存活率,收到產品后,請立即解凍
復蘇細胞。
細胞傳代
1. 細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養瓶中的培養
液,用 PBS 清洗細胞一次;
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀
察,待細胞回縮變圓后加入 5ml *培養液終止消化,再輕輕吹打
細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心
5min;
3. 棄上清,沉淀細胞用 1-2ml *培養基重懸,然后按 1:2 比例進
行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞培養箱中培養。
細胞復蘇
1. 從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其
置入 37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用 75%的酒精擦
拭凍存管外壁;
2. 將凍存管中的細胞移至含 6ml *培養基的 15ml 離心管中,
1000rpm 離心 5min;
3. 棄上清,沉淀用 6ml *培養基重懸,接種 25cm2培養瓶,于 37℃,
5%CO2細胞培養箱中培養。
細胞凍存
1. 細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養瓶中的培養
液,用 PBS 清洗細胞一次;
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀
察,待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化,輕輕吹打細胞使
之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3. 用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍
存管中;
4. 先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h
后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
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