β-gal染色是用來對骨組織染色的一種染色方法,它一種是細胞溶酶體中的水解酶,能把乳糖水解成葡萄糖和半乳糖的酶。
絕大多數正常細胞被認為僅有有限的分裂能力,在不能分裂后就進入衰老(senescence)狀態。此時細胞仍然是存活的,但細胞的基因和蛋白的表達譜發生了很大改變。衰老(senescence)的細胞不能在一些常規的刺激下再誘導細胞分裂,并且衰老細胞的細胞周期分布也比較特殊,不同于一些損傷誘導的細胞休眠,也不同于細胞生長接觸抑制的情況。衰老細胞細胞通常體積變大,表達pH 6.0時有高酶活性的β-半乳糖苷酶
β-gal染色試劑盒(β- Galactosidase Staining Kit是一種基于衰老時SA-阝Gal( senescence- associatedβ- galactosidase)活性水平上調而對衰老細胞或組織進行染色檢測的試劑盒。β-半乳糖苷酶染色試劑盒以Ⅹ-Ga為底物,在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會生成深藍色產物,光學顯微鏡下很容易觀察到變成藍色的表達β-半乳糖苷酶的細胞或組織。對于組織切片或組織塊,可以檢測的樣品數量視樣品的大小而定,對于普通的切片也至少足夠檢測100個樣品,使用6孔板測定,足夠測定100個樣品。
注意事項
1、β-半乳糖苷酧染色固定液有_定的腐蝕性和毒性,操作時請注意防護
2、β-半乳糖苷酶染色反應依賴于特定的pH條件,不能在二氧化碳培養箱中進行染色反應。用于細胞培養的二氧化碳培養箱中較高濃度的二氧化碳會影響染色工作液的pH值,而導致染色失敗。
3、β-半乳糖苷酶染色液B在剛剛溶解后會觀察到有沉淀,屬正?,F象,充分混勻或Ⅴ ortex后,沉淀會全部溶解。作為常規,試劑使用前必須確保沉淀全部溶解,并且混勻。
4、配制染色工作液時需使用聚丙烯(φ polypropylene)容器或玻璃容器,不宜使用聚苯乙烯( polystyrene)容器。但染色時可以在聚苯乙烯( polystyrene)容器中進行,例如普通的6孔板就可以用作染色的容器需自備PBS或HBSS( Hanks balanced salt solution
注:為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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