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細(xì)胞破碎方法有哪些

閱讀:1866        發(fā)布時(shí)間:2022-3-18
  液體剪切壓力:
 
  通過將樣品從高壓腔轉(zhuǎn)入到低壓腔時(shí)產(chǎn)生的快速壓力落差來破碎細(xì)胞
 
  優(yōu)點(diǎn):破碎快速有效,適合大體積細(xì)胞破碎
 
  缺點(diǎn):可導(dǎo)致樣品溫度升高(操作時(shí)需要冷卻系統(tǒng))
 
  超聲
 
  通過高頻率的超聲波破碎細(xì)胞粉碎
 
  優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單
 
  缺點(diǎn):可導(dǎo)致樣品溫度升高,其很難通過冷卻系統(tǒng)降溫,剪切力有可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)受損,噪音較大,破碎量較小
 
  玻璃珠磨碎
 
  用玻璃珠的攪動(dòng)來磨碎細(xì)胞
 
  優(yōu)點(diǎn):對(duì)于很難破碎的細(xì)胞(如酵母)非常有用
 
  缺點(diǎn):有些慢且有噪音
 
  滲透壓
 
  從高滲透壓轉(zhuǎn)向低滲透壓介質(zhì)
 
  優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)便,花費(fèi)低廉
 
  缺點(diǎn):僅用于外壁較脆弱的細(xì)胞(如動(dòng)物細(xì)胞)
 
  反復(fù)凍融
 
  通過反復(fù)形成冰晶破碎細(xì)胞;通常結(jié)合酶法裂解下細(xì)胞
 
  優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)便,花費(fèi)低廉,產(chǎn)生大量細(xì)胞膜碎片
 
  缺點(diǎn):慢,也許會(huì)損傷敏感蛋白質(zhì)或者破壞蛋白質(zhì)和細(xì)胞膜的相互作用,產(chǎn)量低
 
  酶法裂解
 
  常和其他技術(shù)一同使用,如反復(fù)凍融或滲透壓破碎法;溶菌酶是破碎細(xì)菌細(xì)胞壁常用的酶
 
  優(yōu)點(diǎn):溫和,可產(chǎn)生較大的細(xì)胞膜碎片
 
  缺點(diǎn):慢,產(chǎn)量低

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