如何用生物指示劑法測定滅菌器的效果
高壓蒸汽滅菌器由滅菌室、控制系統(tǒng)、過壓保護裝置等組成。利用高溫飽和水蒸汽在一定時間內(nèi)可使微生物的蛋白質(zhì)變性導(dǎo)致微生物死亡的功效,達到對耐濕耐熱物品進行滅菌的目的。
生物指示劑法:
原理:利用非致病性的嗜熱脂肪桿菌的芽孢作為指示菌,來測定熱力滅菌的效果。嗜熱脂肪桿菌的芽孢對熱的抗性較強,其耐熱能力與病原微生物肉毒梭菌芽孢相似,以此為指示菌,驗證滅菌器能否達到滅菌要求。
生物指示劑分為三種:芽孢懸液、芽胞菌片、菌片和培養(yǎng)基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個點:下層的前、中、后和上層、中層的中央點。滅菌后取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白胨水中,55-60℃培養(yǎng)2-7天,若培養(yǎng)基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死,滅菌器滅菌效果良好;如果培養(yǎng)基黃色渾濁,說明芽孢未被殺滅,滅菌器滅菌效果不合格。芽孢懸液和芽孢菌片的驗證方法均是如此。
目前實驗室還常用商品化的生物指示管,其原理與芽孢懸液和芽胞菌片相同,指示管中有嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢和培養(yǎng)液玻璃小管,將指示管放在滅菌容器內(nèi)的各個點上,高壓滅菌后,將管中盛培養(yǎng)液的玻璃管擠碎,培養(yǎng)液從內(nèi)部的小管中被放出,放入56℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),同時做陽性對照。若是滅菌器滅菌效果不合格,指示管內(nèi)的芽孢復(fù)活后生長會改變?nèi)鉁念伾侨鉁優(yōu)辄S色;若是滅菌器滅菌效果良好則管內(nèi)芽孢被滅活不再生長,肉湯仍舊是原來的紫色。